الانتقال إلى المحتوى
VK2/E6E7
الأنسجة
المهبل، الغشاء المخاطي
المرض
الانتباذ البطاني الرحمي الرحمي
المرادفات
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

المستندات

VK2/E6E7

Cell line · رقم المنتج 305653

سلسلة الخلايا VK2/E6E7 هي سلسلة خلايا ظهارية مهبلية بشرية تم إضفاء الخلود عليها باستخدام الجينين المسرطنين E6 وE7 المستمدين من فيروس الورم الحليمي البشري (HPV) من النوع 16...

€375.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا VK2/E6E7 هي سلسلة خلايا ظهارية مهبلية بشرية تم إضفاء الخلود عليها باستخدام الجينات المسرطنة E6 وE7 المستمدة من فيروس الورم الحليمي البشري (HPV) من النوع 16. تعمل طريقة الخلود هذه على إطالة العمر التكاثري للخلايا مع الحفاظ على العديد من الخصائص الوظيفية والمورفولوجية للخلايا الظهارية المهبلية الطبيعية. وتُعد خلايا VK2/E6E7 جزءًا من مجموعة من سلالات الخلايا المُخلدة بفيروس الورم الحليمي البشري من النوع 16 والجينات المسرطنة E6E7، والتي تشمل أيضًا الخلايا الظهارية الخارجية لعنق الرحم (Ect1/E6E7) وخلايا الظهارة الداخلية لعنق الرحم (End1/E6E7)، مما يوفر نموذجًا شاملاً في المختبر لدراسة بيولوجيا الجهاز التناسلي السفلي الأنثوي.

تُظهر خلايا VK2/E6E7 شكلاً يشبه الخلايا الكيراتينية وتشكل مستعمرات غير متراصة في المزرعة، وهو ما يميزها عن المظهر الأكثر طبقية لخلايا عنق الرحم الخارجية. كما تعبر هذه الخلايا عن عدة علامات للتمايز الظهاري، بما في ذلك السيتوكيراتينات CK8 وCK18 وCK19 والإينفولوكرين. ومن المثير للاهتمام أنها تعبر أيضًا عن CK10 و CK13، وهما علامتان مرتبطتان بالتمايز فوق القاعدي في الظهارة الحرشفية الطبقية، مما يشير إلى أنها تحتفظ بالخصائص الرئيسية لخلايا الظهارة المهبلية الطبيعية. بالإضافة إلى ذلك، تعبر خلايا VK2/E6E7 بشكل ضعيف عن المكون الإفرازي (SC) لمستقبلات الغلوبولين المناعي البوليمرية، والذي يكون غالبًا غائبًا في نسيج المهبل ولكنه يُعبَّر عنه بشكل زائد في هذا الخط الخلوي. تجعل هذه السمات من VK2/E6E7 أداة قيّمة لدراسة وظيفة الظهارة المهبلية، والتفاعلات بين المضيف والممرض، وعلم المناعة المخاطي، وكذلك لاختبار العوامل الدوائية المخصصة للاستخدام داخل المهبل.

الأنسجة
المهبل، الغشاء المخاطي
المرض
الانتباذ البطاني الرحمي الرحمي
التطبيقات
زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد
المرادفات
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
نوع الخلية
الظهارة
زمن المضاعفة
24 ساعة

04المعرّفات

المرجع
VK2/E6E7 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305653)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_6471

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
فيروس الورم الحليمي البشري 16 (HPV-16) E6/E7
التعبير عن المستضد
السيتوكيراتينات 8 (CK8)، 10 (CK10)، 13 (CK13)، 18 (CK18)، 19 (CK19)؛ عامل تحفيز مستعمرات البلاعم (M-CSF)؛ عامل النمو المحول بيتا 1؛ إنترلوكين 8 (IL-8)؛ البروستاجلاندين E2؛ مثبط الليكو بروتيناز الإفرازي؛ مستقبل الغلوبولين المناعي البوليمري.

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
32 سنة
الأصل العرقي
غير محدد