- Тъкан
- Бял дроб
- Заболяване
- Белодробен аденокарцином
- Място на метастазите
- Неприложимо (първичен белодробен аденокарцином; липса на документирани отдалечени метастази към момента на определяне на терапевтичния режим)
- Синоними
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Документи
NCI-H23
Cell line · Номер на продукта 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Персонализиране / Препоръки
- NCI-H23Cell line€430.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
- Тази линия е създадена от тъкан от рак на белия дроб, получена от 59-годишен чернокож мъж, пациент с аденокарцином на белия дроб преди терапия. Клетките са носители на мутация на K-ras 12 и мутация в кодон 246 (ATC →ATG, изолевцин -> метионин) на гена p53. Клетките експресират C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras и N-ras РНК. Клетъчната линия има хетерогенна експресия на мРНК за веригата PDGF A и B, трансформиращия растежен фактор алфа и бета и рецептора на епидермалния растежен фактор (EGFR). NCI-H23 показва 20 пъти по-високо ниво на амплификация на c-myc ДНК, без да се открива амплификация на c-myc РНК. Клетките се оцветяват положително за кератини 5+8 и 18 и виментин, но отрицателно за неврофиламент. Клетките са отрицателни по отношение на L-допа декарбоксилазата. Клетките могат да образуват колонии в мека агароза с ефективност от 9,7 %.
- Тъкан
- Бял дроб
- Заболяване
- Белодробен аденокарцином
- Място на метастазите
- Неприложимо (първичен белодробен аденокарцином; липса на документирани отдалечени метастази към момента на определяне на терапевтичния режим)
- Приложения
- Изследвания върху аденокарцинома на белия дроб; биология на недребноклетъчния белодробен карцином (NSCLC) с мутация KRAS G12C; анализ на EGFR-сигналния път; проучвания за амплификация на c-Myc; лекарствена чувствителност (целеви лекарства, химиотерапия); изследвания с панела NCI-60; PDGF/TGF-β сигнализация
- Синоними
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Статус на ГМО
- Без ГМО
- Подробности относно статуса на ГМО
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Епителиален
- Тип клетка
- Епителни клетки
- Време за удвояване
- 38 часа
04Идентификатори
- Източник
- NCI-H23 (каталожен номер 305044 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_1547
05Проява и предразположеност
- Експресия на протеини
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Коефициент на разделяне
- от 1 до 3
- Плътност на засяването
- от 1 до 3 × 10⁴ клетки/см²
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Възстановяване след размразяване
- След размразяването разпределете клетките в култура с плътност 5 × 10⁴ клетки/см² и изчакайте поне 24 часа, докато се прикрепят, преди първата смяна на средата.
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Възраст на донора
- 51 години
- Етническа принадлежност
- Африкански
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
.jpg)
.jpg)
.jpg)
