- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Adenokarcinom i lungan
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (primärt lungadenokarcinom; inga dokumenterade fjärrmetastaser vid tidpunkten för behandlingslinjens inledning)
- Synonymer
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokument
NCI-H23
Cell line · Produktnummer 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Anpassning / Rekommendationer
- NCI-H23Cell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
- Denna linje etablerades från lungcancervävnad från en 59-årig svart manlig lungadenokarcinompatient före behandling. Cellerna bär på en mutation av K-ras 12 och en mutation i kodon 246 (ATC →ATG, isoleucin -> metionin) i p53-genen. Cellerna uttrycker RNA för C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras och N-ras. Cellinjen har ett heterogent mRNA-uttryck för PDGF A- och B-kedjan, transforming growth factor alfa och beta och den epidermala tillväxtfaktorreceptorn (EGFR). NCI-H23 uppvisar en 20-faldigt högre nivå av c-myc DNA-amplifiering utan detekterbar c-myc RNA-amplifiering. Cellerna färgas positivt för keratinerna 5+8 och 18 och vimentin men negativt för neurofilament. Cellerna är L-dopa dekarboxylas-negativa. Cellerna kan bilda kolonier i mjuk agaros med en effektivitet på 9,7%.
- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Adenokarcinom i lungan
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (primärt lungadenokarcinom; inga dokumenterade fjärrmetastaser vid tidpunkten för behandlingslinjens inledning)
- Ansökningar
- Forskning om lungadenokarcinom; biologi hos NSCLC med KRAS G12C-mutation; analys av EGFR-signalvägen; studier av c-Myc-amplifiering; läkemedelskänslighet (målriktade läkemedel, kemoterapi); forskning kring NCI-60-panelen; PDGF/TGF-β-signalering
- Synonymer
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- Utan genetiskt modifierade organismer
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelial
- Celltyp
- Epiteliala celler
- Fördubblingstid
- 38 timmar
04Identifierare
- Källa
- NCI-H23 (Cytion katalognummer 305044)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Uttryck och mottaglighet
- Proteinexpression
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 3
- Såtäthet
- 1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Efter upptining ska cellerna odlas ut med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få vidhäfta i minst 24 timmar innan det första medielbytet.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 51 år
- Etnicitet
- Afrikanska
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
