- Vev
- Lunge
- Sykdom
- Adenokarsinom i lungene
- Metastaseområde
- Ikke relevant (primært lungeadenokarsinom; ingen dokumentert fjernmetastase ved oppstart av behandlingslinjen)
- Synonymer
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumenter
NCI-H23
Cell line · Produktnummer 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Tilpasning / Anbefalinger
- NCI-H23Cell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- Denne linjen ble etablert fra lungekreftvev fra en 59 år gammel, svart mannlig lungeadenokarsinompasient før behandling. Cellene bærer mutasjonen i K-ras 12 og en mutasjon i kodon 246 (ATC →ATG, isoleucin -> metionin) i p53-genet. Cellene uttrykker C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras og N-ras RNA. Cellelinjen har et heterogent mRNA-uttrykk for PDGF A- og B-kjeden, transforming growth factor alfa og beta og den epidermale vekstfaktorreseptoren (EGFR). NCI-H23 viser et 20 ganger høyere nivå av c-myc DNA-amplifikasjon uten påvisbar c-myc RNA-amplifikasjon. Cellene farges positive for keratin 5+8 og 18 og vimentin, men negative for nevrofilament. Cellene er L-dopa dekarboksylase-negative. Cellene kan danne kolonier i myk agarose med en effektivitet på 9,7 %.
- Vev
- Lunge
- Sykdom
- Adenokarsinom i lungene
- Metastaseområde
- Ikke relevant (primært lungeadenokarsinom; ingen dokumentert fjernmetastase ved oppstart av behandlingslinjen)
- Søknader
- Forskning på lungeadenokarsinom; biologi ved KRAS G12C-mutert ikke-småcellet lungekreft (NSCLC); analyse av EGFR-signalveien; studier av c-Myc-amplifikasjon; legemiddelfølsomhet (målrettede legemidler, kjemoterapi); forskning på NCI-60-panelet; PDGF/TGF-β-signalering
- Synonymer
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Mann
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- GMO-status
- Uten GMO
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelial
- Celletype
- Epitelceller
- Fordoblingstid
- 38 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- NCI-H23 (Cytion-katalognummer 305044)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Uttrykk og mottakelighet
- Proteinekspresjon
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Oppdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtetthet
- 1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
- Etter opptining skal cellene sås med en tetthet på 5 × 10⁴ celler/cm², og man må vente i minst 24 timer på at de skal feste seg før det første medieskiftet.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- 51 år
- Etnisitet
- Afrikansk
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
