- Tissue
- Pulmão
- Disease
- Adenocarcinoma pulmonar
- Metastatic site
- Não aplicável (adenocarcinoma pulmonar primário; sem metástase à distância documentada no momento do início do tratamento)
- Synonyms
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Documents
NCI-H23
Cell line · Product number 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- Essa linhagem foi estabelecida a partir de tecido de câncer de pulmão obtido de um paciente negro de 59 anos com adenocarcinoma de pulmão, antes do início do tratamento. As células apresentam a mutação K-ras 12 e uma mutação no códon 246 (ATC → ATG, isoleucina → metionina) do gene p53. As células expressam os RNAs de C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras e N-ras. A linhagem celular apresenta uma expressão heterogênea de mRNA para as cadeias A e B do PDGF, o fator de crescimento transformador alfa e beta e o receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). A NCI-H23 exibe um nível 20 vezes maior de amplificação do DNA de c-myc, sem amplificação detectável do RNA de c-myc. As células apresentam coloração positiva para as queratinas 5+8 e 18 e para a vimentina, mas negativa para o neurofilamento. As células são negativas para a L-dopa descarboxilase. As células podem formar colônias em ágarose mole com uma eficiência de 9,7%.
- Tissue
- Pulmão
- Disease
- Adenocarcinoma pulmonar
- Metastatic site
- Não aplicável (adenocarcinoma pulmonar primário; sem metástase à distância documentada no momento do início do tratamento)
- Applications
- Pesquisa sobre adenocarcinoma pulmonar; biologia do NSCLC com mutação KRAS G12C; análise da via do EGFR; estudos de amplificação do c-Myc; sensibilidade a medicamentos (agentes direcionados, quimioterapia); pesquisa com o painel NCI-60; sinalização do PDGF/TGF-β
- Synonyms
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Epithelial
- Cell type
- Células epiteliais
- Doubling time
- 38 horas
04Identifiers
- Citation
- NCI-H23 (número de catálogo da Cytion 305044)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Split ratio
- 1 a 3
- Seeding density
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 × 10⁴ células/cm² e aguarde pelo menos 24 horas para que se fixem antes da primeira troca de meio.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 51 anos
- Ethnicity
- africano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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