
- Chusteczka
- Płuco
- Choroba
- Gruczolakorak płuc
- Miejsce przerzutów
- Nie dotyczy (pierwotny gruczolakorak płuca; brak udokumentowanych przerzutów odległych w momencie ustalenia schematu leczenia)
- Synonimy
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumenty
NCI-H23
Cell line · Numer produktu 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Dostosowanie / Zalecenia
- NCI-H23Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
- Linia ta została utworzona z tkanki raka płuc uzyskanej od 59-letniego czarnoskórego pacjenta z gruczolakorakiem płuc przed terapią. Komórki są nosicielami mutacji K-ras 12 i mutacji w kodonie 246 (ATC → ATG, izoleucyna -> metionina) genu p53. Komórki wykazują ekspresję RNA C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras i N-ras. Linia komórkowa wykazuje heterogenną ekspresję mRNA dla łańcuchów PDGF A i B, transformującego czynnika wzrostu alfa i beta oraz receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR). NCI-H23 wykazuje 20-krotnie wyższy poziom amplifikacji DNA c-myc bez wykrywalnej amplifikacji c-myc RNA. Komórki wybarwiają się pozytywnie na keratyny 5+8 i 18 oraz wimentynę, ale negatywnie na neurofilament. Komórki są ujemne pod względem dekarboksylazy L-dopa. Komórki mogą tworzyć kolonie w miękkiej agarozie z wydajnością 9,7%.
- Chusteczka
- Płuco
- Choroba
- Gruczolakorak płuc
- Miejsce przerzutów
- Nie dotyczy (pierwotny gruczolakorak płuca; brak udokumentowanych przerzutów odległych w momencie ustalenia schematu leczenia)
- Zastosowania
- Badania nad gruczolakorakiem płuc; biologia niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC) z mutacją KRAS G12C; analiza szlaku EGFR; badania nad amplifikacją genu c-Myc; wrażliwość na leki (leki celowane, chemioterapia); badania z wykorzystaniem panelu NCI-60; sygnalizacja PDGF/TGF-β
- Synonimy
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- Bez GMO
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Nabłonek
- Typ komórki
- Komórki nabłonkowe
- Czas podwojenia
- 38 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- NCI-H23 (numer katalogowy Cytion 305044)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja białek
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 3
- Gęstość wysiewu
- od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu należy wysiać komórki w gęstości 5 × 10⁴ komórek/cm² i odczekać co najmniej 24 godziny, aż komórki przylgną, przed pierwszą wymianą pożywki.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 51 lat
- Pochodzenie etniczne
- Afrykański
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak


.jpg)


.jpg)

.jpg)

