- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในปอด
- Metastatic site
- ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของปอด; ไม่มีเอกสารการแพร่กระจายไปยังที่ห่างไกล ณ เวลาที่จัดตั้งสาย)
- Synonyms
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Documents
NCI-H23
Cell line · Product number 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Customization / Recommendations
- NCI-H23Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- สายพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นจากเนื้อเยื่อมะเร็งปอดที่ได้จากผู้ป่วยชายผิวดำอายุ 59 ปีที่เป็นมะเร็งปอดชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ก่อนการรักษา เซลล์มีการกลายพันธุ์ของ K-ras 12 และการกลายพันธุ์ในโคดอน 246 (ATC →ATG, ไอโซลิวซีน -> เมไทโอนีน) ของยีน p53เซลล์เหล่านี้แสดงออกของ RNA ของ C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras และ N-ras สายเซลล์มีการแสดงออกของ mRNA ที่ไม่สม่ำเสมอสำหรับ PDGF A และ B chain, transforming growth factor alpha และ beta และตัวรับ epidermal growth factor (EGFR)NCI-H23 แสดงระดับการเพิ่มจำนวน DNA ของ c-myc สูงกว่า 20 เท่าโดยไม่พบการเพิ่มจำนวน RNA ของ c-myc ที่ตรวจพบได้ เซลล์ย้อมติดสีบวกสำหรับเคราติน 5+8 และ 18 และวีเมนติน แต่ย้อมติดสีลบสำหรับนิวโรฟิลลามีน เซลล์เป็นลบสำหรับ L-dopa decarboxylase เซลล์สามารถสร้างโคโลนีในอะกาโรสแบบนุ่มได้ด้วยประสิทธิภาพ 9.7%
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในปอด
- Metastatic site
- ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของปอด; ไม่มีเอกสารการแพร่กระจายไปยังที่ห่างไกล ณ เวลาที่จัดตั้งสาย)
- Applications
- การวิจัยมะเร็งปอดชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา; ชีววิทยาของมะเร็งปอดชนิดไม่เซลล์เล็กที่มีกลายพันธุ์ KRAS G12C; การวิเคราะห์เส้นทาง EGFR; การศึกษาการเพิ่มจำนวนของ c-Myc; ความไวต่อยา (ยาที่มุ่งเป้า, เคมีบำบัด); การวิจัยพาเนล NCI-60; การส่งสัญญาณ PDGF/TGF-β
- Synonyms
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- เยื่อบุผิว
- Cell type
- เซลล์เยื่อบุผิว
- Doubling time
- 38 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- NCI-H23 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305044)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Split ratio
- 1 ถึง 3
- Seeding density
- 1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์บนจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 × 10⁴ เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ยึดเกาะอย่างน้อย 24 ชั่วโมงก่อนเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ครั้งแรก
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 51 ปี
- Ethnicity
- แอฟริกัน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
.jpg)
.jpg)
