- Væv
- Lunge
- Sygdom
- Adenokarcinom i lungerne
- Metastasested
- Ikke relevant (primært lungeadenokarcinom; ingen dokumenteret fjernmetastase på tidspunktet for behandlingsforløbets påbegyndelse)
- Synonymer
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumenter
NCI-H23
Cell line · Varenummer 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Tilpasning / Anbefalinger
- NCI-H23Cell line€430.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
- Denne linje blev etableret fra lungekræftvæv fra en 59-årig sort mandlig lungeadenokarcinompatient før behandling. Cellerne bærer mutationen K-ras 12 og en mutation i codon 246 (ATC →ATG, isoleucin -> methionin) i p53-genet. Cellerne udtrykker C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras og N-ras RNA'er. Cellelinjen har et heterogent mRNA-ekspression for PDGF A- og B-kæden, transformerende vækstfaktor alfa og beta og den epidermale vækstfaktorreceptor (EGFR). NCI-H23 udviser et 20 gange højere niveau af c-myc DNA-amplifikation uden påviselig c-myc RNA-amplifikation. Cellerne farver positivt for keratin 5+8 og 18 og vimentin, men negativt for neurofilament. Cellerne er L-dopa decarboxylase-negative. Cellerne kan danne kolonier i blød agarose med en effektivitet på 9,7 %.
- Væv
- Lunge
- Sygdom
- Adenokarcinom i lungerne
- Metastasested
- Ikke relevant (primært lungeadenokarcinom; ingen dokumenteret fjernmetastase på tidspunktet for behandlingsforløbets påbegyndelse)
- Anvendelser
- Forskning i lungeadenokarcinom; biologi ved KRAS G12C-mutant NSCLC; analyse af EGFR-signalvejen; undersøgelser af c-Myc-amplifikation; lægemiddelfølsomhed (målrettede lægemidler, kemoterapi); forskning i NCI-60-panelet; PDGF/TGF-β-signalering
- Synonymer
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Mand
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-fri
- Oplysninger om GMO-status
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitelial
- Celletype
- Epitheliale celler
- Fordoblingstid
- 38 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- NCI-H23 (Cytion katalognummer 305044)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Udtryk og modtagelighed
- Proteinekspression
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Opdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtæthed
- 1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning udplades cellerne med en tæthed på 5 × 10⁴ celler/cm², og der skal gå mindst 24 timer, før det første medieskift foretages, så cellerne kan hæfte sig fast.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 51 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Afrikansk
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
