
- Tkáň
- Plíce
- Nemoc
- Adenokarcinom plic
- Místo metastázy
- Není relevantní (primární adenokarcinom plic; v době zahájení léčby nebyly zaznamenány žádné vzdálené metastázy)
- Synonyma
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumenty
NCI-H23
Cell line · Číslo výrobku 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Přizpůsobení / Doporučení
- NCI-H23Cell line€430.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
- Tato linie byla vytvořena z plicní tkáně získané od 59letého černošského pacienta s adenokarcinomem plic před léčbou. Buňky nesou mutaci K-ras 12 a mutaci v kodonu 246 (ATC →ATG, izoleucin -> methionin) genu p53. Buňky exprimují RNA C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras a N-ras. Buněčná linie má heterogenní expresi mRNA pro řetězce PDGF A a B, transformující růstový faktor alfa a beta a receptor pro epidermální růstový faktor (EGFR). NCI-H23 vykazuje 20krát vyšší úroveň amplifikace DNA c-myc bez detekovatelné amplifikace RNA c-myc. Buňky se barví pozitivně na keratiny 5+8 a 18 a vimentin, ale negativně na neurofilamenta. Buňky jsou negativní na L-dopa dekarboxylázu. Buňky mohou tvořit kolonie v měkké agaróze s účinností 9,7 %.
- Tkáň
- Plíce
- Nemoc
- Adenokarcinom plic
- Místo metastázy
- Není relevantní (primární adenokarcinom plic; v době zahájení léčby nebyly zaznamenány žádné vzdálené metastázy)
- Aplikace
- Výzkum adenokarcinomu plic; biologie NSCLC s mutací KRAS G12C; analýza signální dráhy EGFR; studie amplifikace genu c-Myc; citlivost na léky (cílené přípravky, chemoterapie); výzkum panelu NCI-60; signalizace PDGF/TGF-β
- Synonyma
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Muž
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- Bez GMO
- Podrobnosti o statusu GMO
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelové
- Typ buňky
- Epitelové buňky
- Doba zdvojnásobení
- 38 hodin
04Identifikátory
- Citace
- NCI-H23 (katalogové číslo Cytion 305044)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Exprese a náchylnost
- Exprese proteinů
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Poměr rozdělení
- 1 až 3
- Hustota výsevu
- 1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
- Po rozmrazení naneste buňky na kultivační misky v hustotě 5 × 10⁴ buněk/cm² a před první výměnou média počkejte alespoň 24 hodin, aby se buňky přichytily.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 51 let
- Etnická příslušnost
- Africké
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano


.jpg)


.jpg)

.jpg)

