- Tkivo
- Pljuča
- Bolezen
- Pljučni adenokarcinom
- Mesto metastaze
- Ne velja (primarni pljučni adenokarcinom; ob začetku zdravljenja ni bilo dokumentiranih oddaljenih metastaz)
- Sinonimi
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumenti
NCI-H23
Cell line · Številka izdelka 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Prilagajanje / Priporočila
- NCI-H23Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- Ta linija je bila vzpostavljena iz tkiva pljučnega raka, pridobljenega od 59-letnega temnopoltega moškega bolnika s pljučnim adenokarcinomom pred zdravljenjem. Celice nosijo mutacijo K-ras 12 in mutacijo v kodonu 246 (ATC →ATG, izolevcin -> metionin) gena p53. Celice izražajo RNK C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras in N-ras. Celična linija ima heterogeno izražanje mRNA za verigi PDGF A in B, transformacijska rastna faktorja alfa in beta ter receptor za epidermalni rastni faktor (EGFR). NCI-H23 ima 20-krat višjo stopnjo pomnožitve DNK c-myc brez zaznavne pomnožitve RNK c-myc. Celice se pozitivno obarvajo za keratine 5+8 in 18 ter vimentin, negativno pa za nevrofilament. Celice so negativne na L-dopa dekarboksilazo. Celice lahko tvorijo kolonije v mehki agarozi z učinkovitostjo 9,7 %.
- Tkivo
- Pljuča
- Bolezen
- Pljučni adenokarcinom
- Mesto metastaze
- Ne velja (primarni pljučni adenokarcinom; ob začetku zdravljenja ni bilo dokumentiranih oddaljenih metastaz)
- Uporaba
- Raziskave adenokarcinoma pljuč; biologija nepljučnega malignega karcinoma (NSCLC) z mutacijo KRAS G12C; analiza signalne poti EGFR; študije amplifikacije c-Myc; občutljivost na zdravila (ciljna zdravila, kemoterapija); raziskave na panelu NCI-60; signalizacija PDGF/TGF-β
- Sinonimi
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- Brez gensko spremenjenih organizmov
- Podrobnosti o statusu GSO
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijski
- Vrsta celice
- Epitelijske celice
- Čas podvojitve
- 38 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- NCI-H23 (kataloška številka Cytion 305044)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Izražanje in dovzetnost
- Ekspresija beljakovin
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Razmerje delitve
- 1 do 3
- Gostota setve
- 1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrznitvi celice razporedite po ploščah v gostoti 5 × 10⁴ celic/cm² in jim pred prvo zamenjavo gojišča pustite vsaj 24 ur časa za prirast.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- 51 let
- Etnična pripadnost
- Afriški
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
.jpg)
.jpg)
.jpg)
