- Audinys
- Plaučiai
- Liga
- Plaučių adenokarcinoma
- Metastazių vieta
- Netaikoma (pirminė plaučių adenokarcinoma; gydymo kurso pradžioje nebuvo užfiksuota tolimų metastazių)
- Sinonimai
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumentai
NCI-H23
Cell line · Prekės numeris 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- NCI-H23Cell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
- Ši linija buvo sukurta iš plaučių vėžio audinio, gauto iš 59 metų juodaodžio vyro, sergančio plaučių adenokarcinoma, prieš gydymą. Ląstelėse nustatyta K-ras 12 mutacija ir p53 geno 246 kodono mutacija (ATC →ATG, izoleucinas -> metioninas). Ląstelės ekspresuoja C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras ir N-ras RNR. Ląstelių linija pasižymi heterogeniška PDGF A ir B grandinių, transformuojančio augimo faktoriaus alfa ir beta bei epidermio augimo faktoriaus receptoriaus (EGFR) mRNA raiška. NCI-H23 pasižymi 20 kartų didesne c-myc DNR amplifikacija, o c-myc RNR amplifikacija neaptinkama. Ląstelės teigiamai nudažytos keratinų 5+8 ir 18 bei vimentino, bet neigiamai neurofilamento atžvilgiu. Ląstelės neigiamos L-dopa dekarboksilazei. Ląstelės gali formuoti kolonijas minkštoje agarozėje, jų efektyvumas 9,7 %.
- Audinys
- Plaučiai
- Liga
- Plaučių adenokarcinoma
- Metastazių vieta
- Netaikoma (pirminė plaučių adenokarcinoma; gydymo kurso pradžioje nebuvo užfiksuota tolimų metastazių)
- Paraiškos
- Plaučių adenokarcinomos tyrimai; KRAS G12C mutacijos turinčio neplaučių smulkiųjų ląstelių vėžio (NSCLC) biologija; EGFR signalo kelio analizė; c-Myc amplifikacijos tyrimai; jautrumas vaistams (tiksliniai vaistai, chemoterapija); NCI-60 panelės tyrimai; PDGF/TGF-β signalizacija
- Sinonimai
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- Be GMO
- Išsami informacija apie GMO statusą
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Epitelis
- Ląstelių tipas
- Epitelio ląstelės
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- 38 valandos
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- NCI-H23 (Cytion katalogo numeris 305044)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Išraiška ir jautrumas
- Baltojų baltymų ekspresija
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Skaidymo santykis
- 1–3
- Sėjos tankis
- nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, ląsteles išsėkite į lėkšteles, išlaikydami tankį 5 × 10⁴ ląstelių/cm², ir prieš pirmąjį terpės keitimą palaukite mažiausiai 24 valandas, kol ląstelės prisitvirtins.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 51 metai
- Etninė priklausomybė
- Afrikos
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip
.jpg)
.jpg)
.jpg)
