İçeriğe atla
NCI-H23
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer adenokarsinomu
Metastaz yeri
Uygulanamaz (birincil akciğer adenokarsinomu; tedavi dizisinin başlangıcında belgelenmiş uzak metastaz yok)
Eş anlamlılar
NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23

NCI-H23

Cell line · Ürün numarası 305044

This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu hat, 59 yaşında siyah bir erkek akciğer adenokarsinomu hastasından tedavi öncesinde elde edilen akciğer kanseri dokusundan oluşturulmuştur. Hücreler K-ras 12 mutasyonu ve p53 geninin 246 kodonunda (ATC →ATG, izolösin -> metiyonin) mutasyon taşımaktadır. Hücreler C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras ve N-ras RNA'larını ifade etmektedir. Hücre hattı PDGF A ve B zinciri, dönüştürücü büyüme faktörü alfa ve beta ve epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR) için heterojen bir mRNA ifadesine sahiptir. NCI-H23, tespit edilebilir c-myc RNA amplifikasyonu olmaksızın 20 kat daha yüksek seviyede c-myc DNA amplifikasyonu sergilemektedir. Hücreler keratin 5+8 ve 18 ve vimentin için pozitif, nörofilament için negatif boyanır. Hücreler L-dopa dekarboksilaz-negatiftir. Hücreler yumuşak agarozda %9,7 verimlilikle koloniler oluşturabilir.
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer adenokarsinomu
Metastaz yeri
Uygulanamaz (birincil akciğer adenokarsinomu; tedavi dizisinin başlangıcında belgelenmiş uzak metastaz yok)
Uygulamalar
Akciğer adenokarsinomu araştırmaları; KRAS G12C mutasyonlu NSCLC biyolojisi; EGFR yolak analizi; c-Myc amplifikasyon çalışmaları; ilaç duyarlılığı (hedefli ajanlar, kemoterapi); NCI-60 paneli araştırmaları; PDGF/TGF-β sinyal iletimi
Eş anlamlılar
  • NCI-H23
  • NCI.H23
  • NCI H23
  • H-23
  • NCIH23

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Hücre türü
Epitel hücreleri
İki katına çıkma süresi
38 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H23 (Cytion katalog numarası 305044)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1547

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 × 10⁴ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 × 10⁴ hücre/cm² yoğunluğunda plakalara ekleyin ve ilk besiyeri değişiminden önce hücrelerin yapışması için en az 24 saat bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
51 yıl
Etnik köken
Afrika