- Audums
- Plaušas
- Slimība
- Plaušu adenokarcinoma
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (primāra plaušu adenokarcinoma; ārstēšanas posma sākumā nav dokumentētas attālās metastāzes)
- Sinonīmi
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumenti
NCI-H23
Cell line · Preces numurs 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Pielāgošana / Ieteikumi
- NCI-H23Cell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
- Šī līnija tika izveidota no plaušu vēža audiem, kas iegūti no 59 gadus veca melnādaina vīrieša plaušu adenokarcinomas pacienta pirms terapijas. Šūnām ir K-ras 12 mutācija un p53 gēna 246. kodona mutācija (ATC →ATG, izoleicīns -> metionīns). Šūnas ekspresē C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras un N-ras RNS. Šūnu līnijā ir neviendabīga PDGF A un B ķēdes, transformējošā augšanas faktora alfa un beta un epidermālā augšanas faktora receptora (EGFR) mRNS ekspresija. NCI-H23 uzrāda 20 reižu augstāku c-myc DNS amplifikācijas līmeni bez konstatējamas c-myc RNS amplifikācijas. Šūnām ir pozitīvs keratīnu 5+8 un 18 un vimentīna, bet negatīvs neirofilamenta tests. Šūnas ir negatīvas attiecībā uz L-dopa dekarboksilāzi. Šūnas var veidot kolonijas mīkstajā agarozē ar efektivitāti 9,7 %.
- Audums
- Plaušas
- Slimība
- Plaušu adenokarcinoma
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (primāra plaušu adenokarcinoma; ārstēšanas posma sākumā nav dokumentētas attālās metastāzes)
- Pieteikumi
- Pētījumi par plaušu adenokarcinomu; KRAS G12C mutācijas nesaturoša neplaušu mazšūnu karcinoma (NSCLC) bioloģija; EGFR signālceļa analīze; c-Myc amplifikācijas pētījumi; jutība pret zālēm (mērķtiecīgi līdzekļi, ķīmijterapija); pētījumi ar NCI-60 paneļa izmantošanu; PDGF/TGF-β signālceļi
- Sinonīmi
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- Bez ĢMO
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
- Šūnu tips
- Epitēlija šūnas
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- 38 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- NCI-H23 (Cytion kataloga numurs 305044)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Pazīmes un uzņēmība
- Proteīnu ekspresija
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 3
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izsējiet šūnas blīvumā 5 × 10⁴ šūnas/cm² un pirms pirmās barotnes nomaiņas ļaujiet tām vismaz 24 stundas pielipt.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 51 gads
- Etniskā piederība
- Āfrikas
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
.jpg)
.jpg)
.jpg)
