- Tessuto
- Polmone
- Malattia
- Adenocarcinoma polmonare
- Sito metastatico
- Non applicabile (adenocarcinoma polmonare primario; nessuna metastasi a distanza documentata al momento dell’avvio del trattamento)
- Sinonimi
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Documenti
NCI-H23
Cell line · Codice prodotto 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Personalizzazione / Suggerimenti
- NCI-H23Cell line€430.00
Consigliati (partita più recente)
01Informazioni generali
- Descrizione
- Questa linea è stata creata a partire da un tessuto di cancro al polmone ottenuto da un paziente di 59 anni, di razza nera, affetto da adenocarcinoma polmonare prima della terapia. Le cellule portano la mutazione di K-ras 12 e una mutazione nel codone 246 (ATC →ATG, isoleucina -> metionina) del gene p53. Le cellule esprimono gli RNA C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras e N-ras. La linea cellulare presenta un'espressione eterogenea di mRNA per le catene A e B del PDGF, il fattore di crescita trasformante alfa e beta e il recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR). NCI-H23 presenta un livello di amplificazione del DNA di c-myc 20 volte superiore, senza amplificazione dell'RNA di c-myc rilevabile. Le cellule si colorano positivamente per le cheratine 5+8 e 18 e la vimentina, ma sono negative per il neurofilamento. Le cellule sono L-dopa decarbossilasi-negative. Le cellule possono formare colonie in agarosio morbido con un'efficienza del 9,7%.
- Tessuto
- Polmone
- Malattia
- Adenocarcinoma polmonare
- Sito metastatico
- Non applicabile (adenocarcinoma polmonare primario; nessuna metastasi a distanza documentata al momento dell’avvio del trattamento)
- Applicazioni
- Ricerca sull'adenocarcinoma polmonare; biologia del carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) con mutazione KRAS G12C; analisi della via di segnalazione dell'EGFR; studi sull'amplificazione di c-Myc; sensibilità ai farmaci (agenti mirati, chemioterapia); ricerca sul pannello NCI-60; segnalazione PDGF/TGF-β
- Sinonimi
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Presenza di OGM
- Senza OGM
- Dettagli sullo stato degli OGM
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Epiteliale
- Tipo di cellula
- Cellule epiteliali
- Tempo di raddoppio
- 38 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- NCI-H23 (catalogo Cytion numero 305044)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Espressione e suscettibilità
- Espressione proteica
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Rapporto di frazionamento
- da 1 a 3
- Densità di semina
- da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, seminare le cellule a una densità di 5 × 10⁴ cellule/cm² e attendere almeno 24 ore affinché aderiscano prima del primo cambio di terreno di coltura.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- 51 anni
- Etnia
- Africano
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
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