- Tisu
- Paru-paru
- Penyakit
- Adenokarsinoma paru
- Lokasi metastasis
- Tidak berlaku (adenokarsinoma paru primer; tidak ada metastasis jauh yang tercatat pada saat penetapan lini pengobatan)
- Sinonim
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Dokumen
NCI-H23
Cell line · Nomor produk 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Penyesuaian / Rekomendasi
- NCI-H23Cell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
- Jalur ini dibuat dari jaringan kanker paru-paru yang diperoleh dari pasien adenokarsinoma paru pria kulit hitam berusia 59 tahun sebelum terapi. Sel-sel tersebut membawa mutasi K-ras 12 dan mutasi pada kodon 246 (ATC →ATG, isoleusin -> metionin) dari gen p53. Sel-sel tersebut mengekspresikan C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras, dan N-ras RNA. Garis sel memiliki ekspresi mRNA heterogen untuk rantai PDGF A dan B, mengubah faktor pertumbuhan alfa dan beta dan reseptor faktor pertumbuhan epidermal (EGFR). NCI-H23 menunjukkan tingkat amplifikasi DNA c-myc 20 kali lipat lebih tinggi tanpa amplifikasi RNA c-myc yang terdeteksi. Sel-sel tersebut diwarnai positif untuk keratin 5+8 dan 18 dan vimentin tetapi negatif untuk neurofilamen. Sel-selnya negatif L-dopa dekarboksilase. Sel-sel dapat membentuk koloni dalam agarosa lunak dengan efisiensi 9,7%.
- Tisu
- Paru-paru
- Penyakit
- Adenokarsinoma paru
- Lokasi metastasis
- Tidak berlaku (adenokarsinoma paru primer; tidak ada metastasis jauh yang tercatat pada saat penetapan lini pengobatan)
- Aplikasi
- Penelitian adenokarsinoma paru; biologi NSCLC dengan mutasi KRAS G12C; analisis jalur EGFR; studi amplifikasi c-Myc; sensitivitas terhadap obat (obat bertarget, kemoterapi); penelitian panel NCI-60; sinyal PDGF/TGF-β
- Sinonim
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- Bebas Transgenik
- Rincian status GMO
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Epitel
- Jenis sel
- Sel epitel
- Waktu penggandaan
- 38 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- NCI-H23 (Nomor katalog Cytion 305044)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Ekspresi dan kerentanan
- Ekspresi protein
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Rasio pemisahan
- 1 sampai 3
- Kepadatan penanaman
- 1 hingga 3 × 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 × 10⁴ sel/cm² dan biarkan setidaknya selama 24 jam agar sel menempel sebelum penggantian medium pertama.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 51 tahun
- Etnis
- Afrika
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
.jpg)
.jpg)
.jpg)
