- Tissue
- ריאה
- Disease
- אדנוקרצינומה של הריאה
- Metastatic site
- לא רלוונטי (אדנוקרצינומה ראשונית של הריאה; לא תועדו גרורות מרוחקות בעת קביעת קו הטיפול)
- Synonyms
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Documents
NCI-H23
Cell line · Product number 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- קו זה הוקם מרקמת ריאות סרטנית שנלקחה מחולה בן 59, גבר שחור, הסובל מאדנוקרצינומה של הריאה, לפני הטיפול. התאים נושאים את המוטציה K-ras 12 ומוטציה בקודון 246 (ATC →ATG, איזולאוצין -> מתיונין) של הגן p53. התאים מבטאים RNA של C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras ו-N-ras. לקו התאים ביטוי mRNA הטרוגני עבור שרשרת PDGF A ו-B, גורם גדילה טרנספורמטיבי אלפא וביתא וקולטן גורם גדילה אפידרמלי (EGFR). NCI-H23 מציג רמה גבוהה פי 20 של הגברת DNA c-myc ללא הגברת RNA c-myc ניתנת לזיהוי. התאים נצבעים חיוביים לקרטין 5+8 ו-18 ווימנטין, אך שליליים לנוירופילמנט. התאים הם L-dopa decarboxylase-negative. התאים יכולים ליצור מושבות באגרוז רך ביעילות של 9.7%.
- Tissue
- ריאה
- Disease
- אדנוקרצינומה של הריאה
- Metastatic site
- לא רלוונטי (אדנוקרצינומה ראשונית של הריאה; לא תועדו גרורות מרוחקות בעת קביעת קו הטיפול)
- Applications
- מחקר בנושא אדנוקרצינומה של הריאה; הביולוגיה של סרטן ריאה לא-תאי קטן (NSCLC) עם מוטציה ב-KRAS G12C; ניתוח מסלול ה-EGFR; מחקרים בנושא הגברה של c-Myc; רגישות לתרופות (תרופות ממוקדות, כימותרפיה); מחקר בנושא פאנל NCI-60; מסלולי איתות PDGF/TGF-β
- Synonyms
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
- Cell type
- תאי אפיתל
- Doubling time
- 38 שעות
04Identifiers
- Citation
- NCI-H23 (מספר קטלוגי Cytion 305044)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, יש להניח את התאים בצפיפות של 5 × 10⁴ תאים/סמ"ר ולהמתין לפחות 24 שעות עד שהן ייקלטו לפני החלפת התווך הראשונה.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 51 שנים
- Ethnicity
- אפריקאי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
.jpg)
.jpg)
