- Тканина
- Легені
- Хвороба
- Аденокарцинома легень
- Місце метастазування
- Не застосовується (первинна аденокарцинома легенів; на момент призначення лінії лікування не зафіксовано віддалених метастазів)
- Синоніми
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Документи
NCI-H23
Cell line · Номер товару 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Налаштування / Рекомендації
- NCI-H23Cell line€430.00
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
01Загальна інформація
- Опис
- Ця лінія була створена з тканини раку легень, отриманої від 59-річного чорношкірого чоловіка, хворого на аденокарциному легень, до початку лікування. Клітини несуть мутацію K-ras 12 і мутацію в кодоні 246 (ATC →ATG, ізолейцин -> метіонін) гена р53. Клітини експресують C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras та N-ras РНК. Клітинна лінія має гетерогенну експресію мРНК для ланцюгів PDGF A і B, трансформуючого фактора росту альфа і бета та рецептора епідермального фактора росту (EGFR). NCI-H23 демонструє 20-кратно вищий рівень ампліфікації c-myc ДНК без виявлення ампліфікації c-myc РНК. Клітини позитивно забарвлюються на кератини 5+8 і 18 та віментин, але негативно на нейрофіламенти. Клітини не реагують на L-дофа-декарбоксилазу. Клітини можуть утворювати колонії в м'якій агарозі з ефективністю 9,7%.
- Тканина
- Легені
- Хвороба
- Аденокарцинома легень
- Місце метастазування
- Не застосовується (первинна аденокарцинома легенів; на момент призначення лінії лікування не зафіксовано віддалених метастазів)
- Застосування
- Дослідження аденокарциноми легенів; біологія недрібноклітинного раку легенів із мутацією KRAS G12C; аналіз сигнального шляху EGFR; дослідження ампліфікації c-Myc; чутливість до ліків (цільові препарати, хіміотерапія); дослідження панелі NCI-60; сигнальні шляхи PDGF/TGF-β
- Синоніми
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Класифікація
- Організм
- Людина
- Секс
- Чоловік
- Характеристики росту
- Прихильник
- Статус ГМО
- Без ГМО
- Детальна інформація щодо статусу ГМО
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Рівень біобезпеки
- 1
03Характеристики
- Морфологія
- Епітеліальний
- Тип клітини
- Епітеліальні клітини
- Час подвоєння
- 38 годин
04Ідентифікатори
- Посилання
- NCI-H23 (номер за каталогом Cytion 305044)
- Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
- 9606
- Целозавр
- CVCL_1547
05Експресія та сприйнятливість
- Експресія білків
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Обробка та вирощування
- Живильне середовище
- RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
- Атмосфера інкубації
37°C, 5% CO2, волога атмосфера.
- Добавки
- Додайте до середовища 10% FBS
- Реагент для дисоціації
- Аккутаза
- Пересадка в нове середовище
- Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
- Коефіцієнт розподілу
- від 1 до 3
- Щільність висіву
- від 1 до 3 × 10⁴ клітин/см²
- Оновлення рідини
- 2-3 рази на тиждень
- Відновлення після відлиги
- Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 × 10⁴ клітин/см² і дайте їм прикріпитися протягом щонайменше 24 годин перед першою заміною середовища.
- Розморожування та культивування
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контроль якості та кріоконсервація
- Стерильність
Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.
Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.
- Середовище для заморожування
- Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
- Умови зберігання
Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.
- Умови доставки
Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.
08Донор
- Вік донора
- 51 рік
- Етнічна приналежність
- Африканський
09Правові питання та безпека
- Заходи безпеки
- Плануючи зберігати кріовіал у рідкому азоті для подальшого розморожування, обов'язково слід дотримуватися суворих заходів безпеки. Під час перенесення заморожених зразків до резервуара з рідким азотом або з нього необхідно використовувати захисні рукавички та одяг, а також маску або захисні окуляри. Це необхідно для того, щоб зменшити ризик травмування від потенційних кріогенних вибухів при вилученні, які можуть призвести до розльоту гострих осколків.
- Гарантія
У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту
Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>
- Необхідна угода про передачу матеріалів
- Так
.jpg)
.jpg)
.jpg)
