- الأنسجة
- الرئة
- المرض
- سرطان غدي رئوي
- موقع الانتشار
- لا ينطبق (سرطان غدي رئوي أولي؛ لا توجد نقائل بعيدة موثقة عند بدء خط العلاج)
- المرادفات
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
المستندات
NCI-H23
Cell line · رقم المنتج 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
التخصيص / التوصيات
- NCI-H23Cell line€430.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
- تم إنشاء هذا الخط من أنسجة سرطان الرئة المأخوذة من مريض بسرطان الرئة ذكر أسود يبلغ من العمر 59 عاماً مصاب بسرطان الرئة الغدي قبل العلاج. تحمل الخلايا طفرة في K-ras 12 وطفرة في الكودون 246 (ATC →ATG، إيزولوسين -> ميثيونين) من جين p53. تعبّر الخلايا عن C-myc وL-myc وv-src وv-abl وv-abl وv-erb B وc-raf 1 وHa-ras وKi-ras وN-ras RNA. يحتوي خط الخلية على تعبير غير متجانس للحمض النووي الريبي المرسال لسلسلة PDGF A و B، وعامل النمو المتحول ألفا وبيتا ومستقبل عامل نمو البشرة (EGFR). يُظهر NCI-H23 مستوى أعلى بمقدار 20 ضعفًا من تضخيم الحمض النووي c-myc دون تضخيم الحمض النووي الريبي c-myc القابل للكشف. وتصبغ الخلايا بصبغة إيجابية للكيراتين 5+8 و18 والفيمينتين ولكنها سلبية للخلايا العصبية. تكون الخلايا سالبة لنزع كربوكسيلاز الدوبا. يمكن للخلايا تكوين مستعمرات في أجاروز ناعم بكفاءة 9.7%.
- الأنسجة
- الرئة
- المرض
- سرطان غدي رئوي
- موقع الانتشار
- لا ينطبق (سرطان غدي رئوي أولي؛ لا توجد نقائل بعيدة موثقة عند بدء خط العلاج)
- التطبيقات
- أبحاث سرطان الغدة الرئوي؛ بيولوجيا سرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC) الحامل لمتغير KRAS G12C؛ تحليل مسار EGFR؛ دراسات تضخم جين c-Myc؛ حساسية الأدوية (العلاجات الموجهة، العلاج الكيميائي)؛ أبحاث لوحة NCI-60؛ إشارات PDGF/TGF-β
- المرادفات
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02التصنيف
- كائن حي
- إنسان
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الظهارة
- نوع الخلية
- الخلايا الظهارية
- زمن المضاعفة
- 38 ساعة
04المعرّفات
- المرجع
- NCI-H23 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305044)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9606
- سيلوصور
- CVCL_1547
05التعبير والقابلية للإصابة
- التعبير البروتيني
- Myc+، src+، abl+، erb+، ras+، sis-
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- نسبة التقسيم
- من 1 إلى 3
- كثافة البذر
- من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- التعافي بعد ذوبان الجليد
- بعد إذابة الثلج، قم بزرع الخلايا بمعدل 5 × 10⁴ خلية/سم² واتركها لمدة 24 ساعة على الأقل حتى تلتصق قبل إجراء أول تغيير للوسط.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- عمر المتبرع
- 51 سنة
- الأصل العرقي
- أفريقي
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
.jpg)
.jpg)
.jpg)
