- Tissue
- Pulmón
- Disease
- Adenocarcinoma de pulmón
- Metastatic site
- No aplicable (adenocarcinoma pulmonar primario; sin metástasis a distancia documentadas al momento de establecer la línea de tratamiento)
- Synonyms
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Documents
NCI-H23
Cell line · Product number 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
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01General information
- Description
- Esta línea celular se estableció a partir de tejido de cáncer de pulmón obtenido de un paciente afroamericano de 59 años con adenocarcinoma de pulmón, antes de iniciar el tratamiento. Las células presentan la mutación de K-ras 12 y una mutación en el codón 246 (ATC → ATG, isoleucina → metionina) del gen p53. Las células expresan ARN de C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras y N-ras. La línea celular presenta una expresión heterogénea de ARNm para las cadenas A y B del PDGF, el factor de crecimiento transformante alfa y beta, y el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). La línea NCI-H23 muestra un nivel 20 veces mayor de amplificación del ADN de c-myc sin que se detecte amplificación del ARN de c-myc. Las células se tiñen positivamente para las queratinas 5+8 y 18 y la vimentina, pero negativamente para el neurofilamento. Las células son negativas para la L-dopa descarboxilasa. Las células pueden formar colonias en agarosa blanda con una eficiencia del 9,7 %.
- Tissue
- Pulmón
- Disease
- Adenocarcinoma de pulmón
- Metastatic site
- No aplicable (adenocarcinoma pulmonar primario; sin metástasis a distancia documentadas al momento de establecer la línea de tratamiento)
- Applications
- Investigación sobre el adenocarcinoma de pulmón; biología del cáncer de pulmón no microcítico (NSCLC) con mutación KRAS G12C; análisis de la vía del EGFR; estudios de amplificación de c-Myc; sensibilidad a los fármacos (agentes dirigidos, quimioterapia); investigación con el panel NCI-60; señalización de PDGF/TGF-β
- Synonyms
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Epithelial
- Cell type
- Células epiteliales
- Doubling time
- 38 horas
04Identifiers
- Citation
- NCI-H23 (número de catálogo de Cytion 305044)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Split ratio
- 1 a 3
- Seeding density
- De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24 horas antes del primer cambio de medio.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 51 años
- Ethnicity
- Africano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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