- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Adenocarcinoma do pulmão
- Local da metástase
- Não aplicável (adenocarcinoma pulmonar primário; sem metástases à distância documentadas no momento do início do tratamento)
- Sinónimos
- NCI-H23, NCI.H23, NCI H23, H-23, NCIH23
Documentos
NCI-H23
Cell line · Número do produto 305044
This line was established from lung cancer tissue obtained from a 59-year-old black male lung adenocarcinoma patient prior to therapy. The cells carry the mu...
Personalização / Recomendações
- NCI-H23Cell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
- Esta linha foi estabelecida a partir de tecido de cancro do pulmão obtido de um doente negro de 59 anos, do sexo masculino, com adenocarcinoma do pulmão, antes da terapia. As células são portadoras da mutação de K-ras 12 e de uma mutação no códão 246 (ATC →ATG, isoleucina -> metionina) do gene p53. As células expressam os RNAs C-myc, L-myc, v-src, v-abl, v-erb B, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras e N-ras. A linha celular tem uma expressão heterogénea de ARNm para as cadeias A e B do PDGF, o fator de crescimento transformador alfa e beta e o recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). A NCI-H23 apresenta um nível 20 vezes superior de amplificação do ADN do c-myc sem amplificação detetável do ARN do c-myc. As células apresentam coloração positiva para as queratinas 5+8 e 18 e para a vimentina, mas negativa para o neurofilamento. As células são L-dopa descarboxilase-negativas. As células podem formar colónias em agarose mole com uma eficiência de 9,7%.
- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Adenocarcinoma do pulmão
- Local da metástase
- Não aplicável (adenocarcinoma pulmonar primário; sem metástases à distância documentadas no momento do início do tratamento)
- Aplicações
- Investigação sobre o adenocarcinoma pulmonar; biologia do cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) com mutação KRAS G12C; análise da via do EGFR; estudos sobre a amplificação do c-Myc; sensibilidade aos fármacos (agentes direcionados, quimioterapia); investigação do painel NCI-60; sinalização do PDGF/TGF-β
- Sinónimos
- NCI-H23
- NCI.H23
- NCI H23
- H-23
- NCIH23
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- Sem OGM
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- No genetic modification; wildtype lung adenocarcinoma cell line. Somatic mutations (KRAS G12C, TP53 codon 246) are endogenous tumor-derived changes.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Epitelial
- Tipo de célula
- Células epiteliais
- Tempo de duplicação
- 38 horas
04Identificadores
- Referência
- NCI-H23 (número de catálogo Cytion 305044)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1547
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão proteica
- Myc+, src+, abl+, erb+, ras+, sis -
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Rácio de divisão
- 1 a 3
- Densidade de sementeira
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
- Após a descongelação, semeie as células a uma densidade de 5 × 10⁴ células/cm² e aguarde pelo menos 24 horas para que adiram antes da primeira troca de meio.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 51 anos
- Etnia
- Africano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
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