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AH-130 FN
Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
AH130FN-TC, AH130FN, AH-130F(N), AH-130FN, AH 130 FN

Documentos

AH-130 FN

Cell line · Número de producto 500451

AH-130 FN is a variant of the AH-130 rat ascites tumor cell line, used extensively in studies related to coagulation, fibrinolysis, and metastasis. These ...

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01Información general

Descripción

AH-130 FN es una variante de la línea celular tumoral de ascitis de rata AH-130, muy utilizada en estudios relacionados con la coagulación, la fibrinólisis y la metástasis. Estas células proceden de ratas y suelen mantenerse mediante implantación intraperitoneal seriada en ratas Donryu macho. La propia línea AH-130 es conocida por sus elevadas actividades tromboplásticas y fibrinolíticas, que están relacionadas con su papel en la promoción de la metástasis sanguínea, especialmente en los pulmones. En cambio, la variante FN de la AH-130 tiene una menor actividad tromboplástica y fibrinolítica. Esta diferencia de actividad enzimática entre el AH-130 y el AH-130 FN es crucial, ya que influye en la formación de trombos y en el número de focos metastásicos en los pulmones tras la inoculación intravenosa.

Las investigaciones han demostrado que, tras la inyección intravenosa, las células AH-130 provocan una reducción significativa del recuento de plaquetas y de los niveles de fibrinógeno, lo que indica un aumento de la formación de trombos. Este efecto es notablemente más pronunciado que en la AH-130 FN. Los estudios histológicos demuestran que la AH-130 forma focos metastásicos más abundantes en los pulmones en comparación con la AH-130 FN, tanto a las 72 horas como a los 7 días post-inoculación. La AH-130 está asociada a la formación de trombos compuestos por plaquetas y fibrina alrededor de las células tumorales embolizadas, mientras que la AH-130 FN muestra una escasa formación de trombos. Estos hallazgos sugieren que la mayor actividad tromboplástica de AH-130 desempeña un papel significativo en la promoción de la metástasis a través de la agregación plaquetaria y la deposición de fibrina alrededor de las células tumorales, un proceso menos prominente en AH-130 FN.

Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
  • AH130FN-TC
  • AH130FN
  • AH-130F(N)
  • AH-130FN
  • AH 130 FN

02Clasificación

Organismo
Rata
Propiedades de crecimiento
Adherente y en suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Células redondas en suspensión, de aspecto epitelial cuando se adhieren
Tumorigénico
Sí, en ratas Wistar.

04Identificadores

Referencia
AH-130 FN (número de catálogo Cytion 500451)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5683

05Expresión y susceptibilidad

Virus
Prueba RAP negativa. .

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando hacia arriba y hacia abajo, y luego tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión para alcanzar una concentración celular de 1 x 105 células/ml con medio de cultivo fresco, y divida la suspensión ajustada en nuevos matraces para su posterior cultivo.
Densidad de siembra
1 x 106 células/cm2
Renovación de fluidos
Cada 3 a 5 días
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.