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AH-130 FN
Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
AH130FN-TC, AH130FN, AH-130F(N), AH-130FN, AH 130 FN

Documentos

AH-130 FN

Cell line · Número do produto 500451

AH-130 FN is a variant of the AH-130 rat ascites tumor cell line, used extensively in studies related to coagulation, fibrinolysis, and metastasis. These ...

€550.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A AH-130 FN é uma variante da linha de células tumorais de ascite de rato AH-130, utilizada extensivamente em estudos relacionados com a coagulação, fibrinólise e metástases. Estas células foram derivadas de ratos e são normalmente mantidas por implantação intraperitoneal em série em ratos Donryu machos. A linha AH-130 é conhecida pelas suas elevadas actividades tromboplásticas e fibrinolíticas, que estão relacionadas com o seu papel na promoção de metástases transmitidas pelo sangue, especialmente nos pulmões. Em contrapartida, a variante AH-130 FN tem uma atividade tromboplástica e fibrinolítica inferior. Esta diferença na atividade enzimática entre o AH-130 e o AH-130 FN é crucial, uma vez que influencia a formação de trombos e o número de focos metastáticos nos pulmões após a inoculação intravenosa.

A investigação demonstrou que, após injeção intravenosa, as células AH-130 provocam uma redução significativa da contagem de plaquetas e dos níveis de fibrinogénio, o que indica um aumento da formação de trombos. Este efeito é notavelmente mais pronunciado do que no AH-130 FN. Estudos histológicos demonstram que o AH-130 forma focos metastáticos mais abundantes nos pulmões do que o AH-130 FN, tanto 72 horas como 7 dias após a inoculação. O AH-130 está associado à formação de trombos compostos por plaquetas e fibrina à volta das células tumorais embolizadas, enquanto o AH-130 FN apresenta uma formação esparsa de trombos. Estes resultados sugerem que a maior atividade tromboplástica do AH-130 desempenha um papel significativo na promoção de metástases através da agregação de plaquetas e da deposição de fibrina em torno das células tumorais, um processo menos proeminente no AH-130 FN.

Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
  • AH130FN-TC
  • AH130FN
  • AH-130F(N)
  • AH-130FN
  • AH 130 FN

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células redondas em suspensão, de tipo epitelial quando aderentes
Tumorigénico
Sim, em ratos Wistar.

04Identificadores

Referência
AH-130 FN (número de catálogo Cytion 500451)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5683

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Teste RAP negativo. .

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Densidade de sementeira
1 x 106 células/cm2
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.