Mine otse sisu juurde
AH-130 FN
Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
AH130FN-TC, AH130FN, AH-130F(N), AH-130FN, AH 130 FN

Dokumendid

AH-130 FN

Cell line · Toote number 500451

AH-130 FN is a variant of the AH-130 rat ascites tumor cell line, used extensively in studies related to coagulation, fibrinolysis, and metastasis. These ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

AH-130 FN on AH-130 rottide astsiidi kasvajarakkude liini variant, mida kasutatakse laialdaselt koagulatsiooni, fibrinolüüsi ja metastaaside uuringutes. Need rakud on saadud rottidelt ja neid hoitakse tavaliselt isaste Donryu rottide järjestikuse kõhuõõnesisese implanteerimise teel. AH-130 liin ise on tuntud oma suure tromboplastilise ja fibrinolüütilise aktiivsuse poolest, mis on seotud selle rolliga veresuunaliste metastaaside tekke soodustamisel, eriti kopsudes. Seevastu AH-130 FN variandil on madalam tromboplastiline ja fibrinolüütiline aktiivsus. See erinevus AH-130 ja AH-130 FN ensümaatilises aktiivsuses on oluline, kuna see mõjutab trombi moodustumist ja metastaatiliste fookuste arvu kopsudes pärast intravenoosset inokulatsiooni.

Uuringud on näidanud, et pärast intravenoosset süstimist põhjustavad AH-130 rakud trombotsüütide arvu ja fibrinogeeni taseme märkimisväärset vähenemist, mis viitab trombi suurenenud moodustumisele. See mõju on märgatavalt tugevam kui AH-130 FN puhul. Histoloogilised uuringud näitavad, et AH-130 moodustab kopsudes rohkemaid metastaatilisi fookusi võrreldes AH-130 FN-ga nii 72 tundi kui ka 7 päeva pärast inokulatsiooni. AH-130 on seotud trombotsüütidest ja fibriinist koosnevate trombi moodustumisega emboliseerunud kasvajarakkude ümber, samas kui AH-130 FN näitab hõredat trombi moodustumist. Need leiud viitavad sellele, et AH-130 suurem tromboplastiline aktiivsus mängib olulist rolli metastaaside tekke soodustamisel trombotsüütide agregatsiooni ja fibriini ladestumise kaudu kasvajarakkude ümber, mis on AH-130 FN puhul vähem silmatorkav.

Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
  • AH130FN-TC
  • AH130FN
  • AH-130F(N)
  • AH-130FN
  • AH 130 FN

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud suspensioonis, epiteelilaadsed, kui need on kleepuvad
Tuumorigeenne
Jah, Wistari rottidel.

04Tunnused

Viide
AH-130 FN (Cytioni katalooginumber 500451)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_5683

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
RAP-test negatiivne. .

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Külvitihedus
1 x 106 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.