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AH-130 FN
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Sinonimi
AH130FN-TC, AH130FN, AH-130F(N), AH-130FN, AH 130 FN

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AH-130 FN

Cell line · Codice prodotto 500451

AH-130 FN is a variant of the AH-130 rat ascites tumor cell line, used extensively in studies related to coagulation, fibrinolysis, and metastasis. These ...

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01Informazioni generali

Descrizione

L'AH-130 FN è una variante della linea cellulare tumorale di ascite di ratto AH-130, ampiamente utilizzata negli studi sulla coagulazione, la fibrinolisi e le metastasi. Queste cellule sono state derivate da ratti e sono tipicamente mantenute mediante impianto intraperitoneale seriale in ratti maschi Donryu. La linea AH-130 è nota per le sue elevate attività tromboplastiche e fibrinolitiche, legate al suo ruolo nel promuovere le metastasi per via ematica, soprattutto nei polmoni. Al contrario, la variante FN di AH-130 ha un'attività tromboplastica e fibrinolitica inferiore. Questa differenza di attività enzimatica tra AH-130 e AH-130 FN è cruciale perché influenza la formazione di trombi e il numero di focolai metastatici nei polmoni dopo l'inoculazione endovenosa.

La ricerca ha dimostrato che, dopo l'iniezione endovenosa, le cellule AH-130 causano una riduzione significativa della conta piastrinica e dei livelli di fibrinogeno, indicando un aumento della formazione di trombi. Questo effetto è notevolmente più pronunciato rispetto alle cellule AH-130 FN. Studi istologici dimostrano che AH-130 forma focolai metastatici più abbondanti nei polmoni rispetto a AH-130 FN, sia a 72 ore che a 7 giorni dall'inoculazione. AH-130 è associato alla formazione di trombi composti da piastrine e fibrina intorno alle cellule tumorali embolizzate, mentre AH-130 FN mostra una scarsa formazione di trombi. Questi risultati suggeriscono che la maggiore attività tromboplastica di AH-130 svolge un ruolo significativo nella promozione delle metastasi attraverso l'aggregazione piastrinica e la deposizione di fibrina intorno alle cellule tumorali, un processo meno evidente in AH-130 FN.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Sinonimi
  • AH130FN-TC
  • AH130FN
  • AH-130F(N)
  • AH-130FN
  • AH 130 FN

02Classificazione

Organismo
Ratto
Proprietà di crescita
Aderente e in sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Cellule rotonde in sospensione, simili a quelle epiteliali quando sono aderenti
Tumorigenico
Sì, nei ratti Wistar.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
AH-130 FN (numero di catalogo Cytion 500451)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5683

05Espressione e suscettibilità

Virus
Test RAP negativo. .

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Densità di semina
1 x 106 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3-5 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.