Siirry sisältöön
MCA-205
Sairaus
Hiiren fibrosarkooma
Synonyymit
MCA 205, MCA205

Asiakirjat

MCA-205

Cell line · Tuotenumero 305730

MCA-205 on C57BL/6-hiiristä peräisin oleva hiiren fibrosarkoomasolulinja. Se perustettiin alun perin metyylikolantreenin aiheuttaman kasvaimenmuodostuksen avulla, joka on...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MCA-205 on C57BL/6-hiiristä peräisin oleva hiiren fibrosarkoomasolulinja. Se perustettiin alun perin metyylikolantreenilla indusoidun tuumorigenesiin avulla, joka on klassinen kemiallinen karsinogeneesimenetelmä, jota käytetään laajalti siirrettävien tuumorimallien luomiseen syngeenisissä hiirissä. MCA-205 toimii immunokompetenttina kasvainmallina, mikä tarkoittaa, että se voidaan implantoida immunokompetentteihin C57BL/6-hiiriin ilman hylkimisreaktiota, minkä vuoksi se sopii erinomaisesti syövän immunoterapian ja kasvainimmunologian prekliinisiin tutkimuksiin.

Biologisesti MCA-205-kasvaimet luokitellaan ei-immunogeenisiksi tai heikosti immunogeenisiksi, mikä heijastaa niiden alhaista perusantigeenisyyttä ja vähäistä alttiutta spontaanille immuunivälitteiselle hylkimiselle. Tämä ominaisuus on erityisen hyödyllinen arvioitaessa checkpoint-estäjähoitojen (kuten anti-PD-1 tai anti-CTLA-4) tai kasvainrokotteiden tehoa olosuhteissa, jotka heijastavat monien ihmisen syöpien immuunivälitteistä luonnetta. Heikosta luontaisesta immunogeenisyydestään huolimatta MCA-205-kasvaimet voivat reagoida immuunimodulaatioon, kun niitä yhdistetään sädehoitoon, onkolyyttisiin viruksiin tai TLR-agonisteihin, mikä tekee niistä monipuolisen alustan yhdistelmähoitojen testaamiseen.

MCA-205-solut kasvavat nopeasti sekä in vitro että in vivo ja muodostavat aggressiivisia fibrosarkoomia, kun ne ruiskutetaan ihon alle. Näillä kasvaimilla on korkea verisuonitusaste ja ne tukevat toistettavaa kasvaimen kasvukineettistä, mikä mahdollistaa kasvaimen kuormituksen ja hoitovasteen johdonmukaisen mittaamisen. Hiiristä peräisin olevien ja C57BL/6-hiirien kanssa syngeenisten MCA-205-solujen vuoksi ne eivät sovellu ihmiselle ominaisiin määrityksiin, mutta ovat välttämättömiä immuunimekanismien tutkimisessa täysin toimivassa isäntäimmuunijärjestelmässä.

Sairaus
Hiiren fibrosarkooma
Synonyymit
  • MCA 205
  • MCA205

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
MCA-205 (Cytion-tuotenumero 305730)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_VR90

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.