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Cellules HEL-299
Tissu
Poumon
Synonymes
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

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Cellules HEL-299

Cell line · Référence du produit 300193

HEL-299 est une lignée cellulaire de fibroblastes pulmonaires humains issue d'un individu adulte. Cette lignée cellulaire se distingue notamment par sa capacité limitée à se multiplier...

€430.00hors taxes et frais de port
Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

HEL-299 est une lignée cellulaire de fibroblastes pulmonaires humains dérivée d'un individu adulte. Cette lignée cellulaire est particulièrement connue pour sa capacité limitée à se propager en culture, entrant généralement en sénescence après environ dix passages. Cette caractéristique fait de HEL-299 un modèle utile pour l'étude du vieillissement cellulaire et de la sénescence, ainsi que de la dynamique de la croissance et de la réplication cellulaires dans des conditions contrôlées.

Outre ses applications dans la recherche sur le vieillissement, HEL-299 sert également de modèle pour l'étude des voies de transduction des signaux. En particulier, il a été observé que l'expression du récepteur muscarinique M2 dans ces cellules est régulée à la baisse après stimulation par la protéine kinase C. Cette réponse souligne l'utilité de la lignée cellulaire dans la recherche pharmacologique et dans l'étude des mécanismes sous-jacents à la signalisation et à la régulation médiées par les récepteurs. L'altération de l'expression du récepteur suite à l'activité de la kinase peut fournir des informations sur les réponses cellulaires à des stimuli externes, ce qui pourrait contribuer au développement de stratégies thérapeutiques ciblant des voies similaires dans diverses maladies.

Tissu
Poumon
Synonymes
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Caryotype
Homme normal, diploïde, stable

04Identifiants

Référence
HEL-299 (numéro de catalogue Cytion 300193)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Récepteur muscarinique M2
Expression des protéines
P53 négatif
Isoenzymes
G6PD, A
Sensibilité aux virus
Stomatite vésiculaire (Indiana), poliovirus 1
Transcriptase inverse
Négatif

06Manipulation et culture

Milieu de culture
Ham's F12, w : 1.0 mM Glutamine stable, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.1 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820600a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS, 1 ng/mL de bFGF
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Fœtus
Origine ethnique
Africains