İçeriğe atla
HEL-299 Hücreleri
Doku
Akciğer
Eş anlamlılar
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

HEL-299 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300193

HEL-299, yetişkin bir kişiden elde edilen bir insan akciğer fibroblast hücre hattıdır. Bu hücre hattı, çoğalma kapasitesinin sınırlı olmasıyla özellikle dikkat çeker...

€430.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HEL-299 yetişkin bir bireyden türetilen bir insan akciğer fibroblast hücre hattıdır. Bu hücre hattı özellikle kültürde çoğalma kapasitesinin sınırlı olmasıyla dikkat çeker ve tipik olarak yaklaşık on pasajdan sonra yaşlanmaya girer. Bu özellik, HEL-299'u hücresel yaşlanma ve yaşlanmanın yanı sıra kontrollü koşullar altında hücre büyümesi ve çoğalmasının dinamiklerini incelemek için yararlı bir model haline getirmektedir.

Yaşlanma araştırmalarındaki uygulamalarına ek olarak, HEL-299 sinyal iletim yollarını incelemek için de bir model görevi görmektedir. Özellikle, bu hücrelerdeki M2 muskarinik reseptör ifadesinin protein kinaz C ile uyarılmayı takiben aşağı doğru düzenlendiği gözlemlenmiştir. Bu yanıt, hücre hattının farmakolojik araştırmalarda ve reseptör aracılı sinyalizasyon ve düzenlemenin altında yatan mekanizmaların araştırılmasındaki faydasını vurgulamaktadır. Kinaz aktivitesini takiben reseptör ekspresyonundaki değişiklik, dış uyaranlara karşı hücresel tepkiler hakkında bilgi sağlayabilir ve potansiyel olarak çeşitli hastalıklarda benzer yolları hedefleyen terapötik stratejilerin geliştirilmesine yardımcı olabilir.

Doku
Akciğer
Eş anlamlılar
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Karyotip
Normal insan erkeği, diploid, stabil

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HEL-299 (Cytion katalog numarası 300193)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
M2 muskarinik reseptör
Protein ekspresyonu
P53 negatif
İzoenzimler
G6PD, A
Virüse karşı duyarlılık
Veziküler stomatit (Indiana), poliovirüs 1
Ters transkriptaz
Negatif

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Ham's F12, w: 1.0 mM stabil Glutamin, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.1 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820600a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, 1 ng/mL bFGF ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs
Etnik köken
Afrika