Tartalomra ugrás
HEL-299 sejtek
Szövet
Tüdő
Szinonimák
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Dokumentumok

HEL-299 sejtek

Cell line · Termékszám 300193

A HEL-299 egy felnőtt egyéntől származó emberi tüdőfibroblaszt-sejtvonal. Ez a sejtvonal különösen arról ismert, hogy szaporodási képessége korlátozott...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Rendelésre készül
1

01Általános információk

Leírás

A HEL-299 egy felnőtt egyedből származó humán tüdőfibroblaszt sejtvonal. Ez a sejtvonal különösen arról nevezetes, hogy véges a tenyészthetőségük, és jellemzően körülbelül tíz passzázs után szeneszcenciába lép. Ez a tulajdonság teszi a HEL-299-et hasznos modellé a sejtek öregedésének és szeneszcenciájának, valamint a sejtnövekedés és -szaporodás dinamikájának tanulmányozására ellenőrzött körülmények között.

Az öregedés kutatásában való alkalmazásán túlmenően a HEL-299 modellként szolgál a jelátviteli útvonalak tanulmányozására is. Különösen azt figyelték meg, hogy az M2 muskarin receptor expressziója ezekben a sejtekben a protein kináz C-vel történő stimulációt követően lecsökken. Ez a válasz kiemeli a sejtvonal hasznosságát a farmakológiai kutatásokban és a receptorok által közvetített jelátvitel és szabályozás alapjául szolgáló mechanizmusok vizsgálatában. A receptor expressziójának a kináz aktivitást követő megváltozása betekintést nyújthat a külső ingerekre adott sejtválaszokba, ami potenciálisan segíthet a különböző betegségek hasonló útvonalait célzó terápiás stratégiák kifejlesztésében.

Szövet
Tüdő
Szinonimák
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Kariotípus
Normál emberi hím, diploid, stabil

04Azonosítók

Hivatkozás
HEL-299 (Cytion katalógusszám: 300193)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
M2 muskarin receptor
Fehérjeexpresszió
P53 negatív
Izoenzimek
G6PD, A
Vírusérzékenység
Hólyagos szájgyulladás (Indiana), poliovírus 1
Fordított transzkriptáz
Negatív

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 1 ng/mL bFGF-fel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat
Etnikai hovatartozás
Afrikai