HEL-299 sejtek
Cell line · Termékszám 300193
A HEL-299 egy felnőtt egyéntől származó emberi tüdőfibroblaszt-sejtvonal. Ez a sejtvonal különösen arról ismert, hogy szaporodási képessége korlátozott...
Személyre szabás / Ajánlások
- HEL-299 sejtekCell line€430.00
01Általános információk
- Leírás
A HEL-299 egy felnőtt egyedből származó humán tüdőfibroblaszt sejtvonal. Ez a sejtvonal különösen arról nevezetes, hogy véges a tenyészthetőségük, és jellemzően körülbelül tíz passzázs után szeneszcenciába lép. Ez a tulajdonság teszi a HEL-299-et hasznos modellé a sejtek öregedésének és szeneszcenciájának, valamint a sejtnövekedés és -szaporodás dinamikájának tanulmányozására ellenőrzött körülmények között.
Az öregedés kutatásában való alkalmazásán túlmenően a HEL-299 modellként szolgál a jelátviteli útvonalak tanulmányozására is. Különösen azt figyelték meg, hogy az M2 muskarin receptor expressziója ezekben a sejtekben a protein kináz C-vel történő stimulációt követően lecsökken. Ez a válasz kiemeli a sejtvonal hasznosságát a farmakológiai kutatásokban és a receptorok által közvetített jelátvitel és szabályozás alapjául szolgáló mechanizmusok vizsgálatában. A receptor expressziójának a kináz aktivitást követő megváltozása betekintést nyújthat a külső ingerekre adott sejtválaszokba, ami potenciálisan segíthet a különböző betegségek hasonló útvonalait célzó terápiás stratégiák kifejlesztésében.
- Szövet
- Tüdő
- Szinonimák
- HEL 299
- Hel-299
- Hel 299
- HEL299
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Kariotípus
- Normál emberi hím, diploid, stabil
04Azonosítók
- Hivatkozás
- HEL-299 (Cytion katalógusszám: 300193)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2480
05Kifejeződés és fogékonyság
- Kifejeződő receptorok
- M2 muskarin receptor
- Fehérjeexpresszió
- P53 negatív
- Izoenzimek
- G6PD, A
- Vírusérzékenység
- Hólyagos szájgyulladás (Indiana), poliovírus 1
- Fordított transzkriptáz
- Negatív
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 1 ng/mL bFGF-fel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Ültetési sűrűség
- 1 x 104 sejt/cm2
- Az olvadás utáni helyreállás
- Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- Magzat
- Etnikai hovatartozás
- Afrikai
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen
.jpg)