Gå direkte til indholdet
HEL-299-celler
Væv
Lunge
Synonymer
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Dokumenter

HEL-299-celler

Cell line · Varenummer 300193

HEL-299 er en human lungefibroblast-cellelinje, der stammer fra en voksen person. Denne cellelinje er især kendt for sin begrænsede evne til at formere sig i...

€430.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HEL-299 er en human lungefibroblastcellelinje, der stammer fra et voksent individ. Denne cellelinje er især kendt for sin begrænsede evne til at formere sig i kultur og går typisk i senescens efter ca. ti passager. Denne egenskab gør HEL-299 til en nyttig model til at studere cellulær aldring og senescens samt dynamikken i cellevækst og -replikation under kontrollerede forhold.

Ud over sine anvendelser i aldringsforskningen fungerer HEL-299 også som en model til at studere signaltransduktionsveje. Specifikt er det blevet observeret, at udtrykket af den muskarine M2-receptor i disse celler nedreguleres efter stimulering med proteinkinase C. Denne respons fremhæver cellelinjens anvendelighed i farmakologisk forskning og i undersøgelsen af mekanismer, der ligger til grund for receptormedieret signalering og regulering. Ændringen i receptorekspressionen efter kinaseaktivitet kan give indsigt i cellulære reaktioner på eksterne stimuli og potentielt hjælpe med at udvikle terapeutiske strategier, der er rettet mod lignende veje i forskellige sygdomme.

Væv
Lunge
Synonymer
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Karyotype
Normalt menneske af hankøn, diploid, stabil

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEL-299 (Cytion katalognummer 300193)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
M2 muskarinreceptor
Proteinekspression
P53 negativ
Isoenzymer
G6PD, A
Virusfølsomhed
Vesikulær stomatitis (Indiana), poliovirus 1
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS, 1 ng/mL bFGF
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Foster
Etnisk tilhørsforhold
Afrikansk