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HEL-299細胞
ティッシュ
肺
同義語
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

HEL-299細胞

Cell line · 製品番号 300193

HEL-299は、成人から採取されたヒト肺線維芽細胞株です。この細胞株は、増殖能力に限りがあることで特に知られており……

€430.00税・送料別
受注生産
1

01概要

説明

HEL-299は、成人個体由来のヒト肺線維芽細胞株である。この細胞株は、培養中の増殖能力が有限であることが特に注目され、通常約10回の継代で老化に入る。この特徴により、HEL-299は、細胞の老化と老衰、また制御された条件下での細胞の増殖と複製の動態を研究するための有用なモデルとなっている。

老化研究への応用に加えて、HEL-299はシグナル伝達経路を研究するモデルとしても役立つ。特に、この細胞におけるM2ムスカリンレセプターの発現が、プロテインキナーゼCで刺激されるとダウンレギュレートされることが観察されている。この反応は、薬理学的研究や、レセプターを介したシグナル伝達と調節の基礎となるメカニズムの研究において、この細胞株が有用であることを強調している。キナーゼ活性に伴う受容体発現の変化は、外部刺激に対する細胞応答についての洞察を提供し、様々な疾患において同様の経路を標的とする治療戦略の開発に役立つ可能性がある。

ティッシュ
肺
同義語
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

核型
正常ヒト男性、2倍体、安定

04識別子

引用
HEL-299 (Cytion カタログ番号 300193)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_2480

05発現と感受性

発現している受容体
M2ムスカリン受容体
タンパク質の発現
P53陰性
アイソザイム
G6PD、A
ウイルス感受性
水疱性口内炎(インディアナ州)、ポリオウイルス1型
逆転写酵素
ネガティブ

06取り扱いと飼育

培地
Ham's F12、w:1.0mM安定グルタミン、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム、w:1.1g/L NaHCO3(Cytion article number 820600a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、1 ng/mL bFGFを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児
民族
アフリカ人