Gå til innholdet
HEL-299-celler
Vev
Lunge
Synonymer
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Dokumenter

HEL-299-celler

Cell line · Produktnummer 300193

HEL-299 er en cellekultur av humane lungefibroblaster hentet fra en voksen person. Denne cellekulturen er særlig kjent for sin begrensede evne til å formere seg i...

€430.00ekskl. mva. og frakt
Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HEL-299 er en human lungefibroblastcellelinje som stammer fra et voksent individ. Denne cellelinjen er spesielt kjent for sin begrensede evne til å formere seg i kultur, og går vanligvis inn i senescens etter omtrent ti passeringer. Denne egenskapen gjør HEL-299 til en nyttig modell for studier av cellulær aldring og senescens, samt dynamikken i cellevekst og -replikasjon under kontrollerte forhold.

I tillegg til å kunne brukes i aldringsforskning, fungerer HEL-299 også som en modell for å studere signaltransduksjonsveier. Det er spesielt observert at uttrykket av M2-muskarinreseptoren i disse cellene nedreguleres etter stimulering med proteinkinase C. Denne responsen fremhever cellelinjens nytteverdi i farmakologisk forskning og i undersøkelser av mekanismer som ligger til grunn for reseptormediert signalering og regulering. Endringen i reseptoruttrykket som følge av kinaseaktivitet kan gi innsikt i cellulære responser på ytre stimuli, noe som potensielt kan bidra til utvikling av terapeutiske strategier rettet mot lignende signalveier i ulike sykdommer.

Vev
Lunge
Synonymer
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Karyotype
Normalt mannlig menneske, diploid, stabil

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEL-299 (Cytion katalognummer 300193)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
M2 muskarinreseptor
Proteinekspresjon
P53 negativ
Isoenzymer
G6PD, A
Virusfølsomhet
Vesikulær stomatitt (Indiana), poliovirus 1
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12, m: 1,0 mM stabil glutamin, m: 1,0 mM natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820600a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS, 1 ng/mL bFGF
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Foster
Etnisitet
Afrikansk