Prejsť na obsah
Bunky HEL-299
Tkanivo
Pľúca
Synonymá
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Dokumenty

Bunky HEL-299

Cell line · Číslo výrobku 300193

HEL-299 je bunková línia ľudských pľúcnych fibroblastov získaná z dospelého jedinca. Táto bunková línia je známa najmä svojou obmedzenou schopnosťou množiť sa...

€430.00bez DPH a poštovného
Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis

HEL-299 je ľudská bunková línia pľúcnych fibroblastov odvodená od dospelého jedinca. Táto bunková línia sa vyznačuje najmä svojou obmedzenou schopnosťou rozmnožovania v kultúre, pričom zvyčajne po približne desiatich pasážach vstupuje do senescencie. Vďaka tejto vlastnosti je HEL-299 užitočným modelom na štúdium bunkového starnutia a senescencie, ako aj dynamiky rastu a replikácie buniek za kontrolovaných podmienok.

Okrem využitia vo výskume starnutia slúži HEL-299 aj ako model na štúdium signálnych transdukčných dráh. Konkrétne sa zistilo, že expresia muskarínového receptora M2 v týchto bunkách je znížená po stimulácii proteínkinázou C. Táto reakcia zdôrazňuje užitočnosť bunkovej línie vo farmakologickom výskume a pri skúmaní mechanizmov, ktoré sú základom signalizácie a regulácie sprostredkovanej receptormi. Zmena expresie receptora po kinázovej aktivite môže poskytnúť pohľad na bunkové reakcie na vonkajšie podnety, čo môže pomôcť pri vývoji terapeutických stratégií zameraných na podobné dráhy pri rôznych ochoreniach.

Tkanivo
Pľúca
Synonymá
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Karyotyp
Normálny ľudský samec, diploidný, stabilný

04Identifikátory

Citácia
HEL-299 (katalógové číslo Cytion 300193)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
M2 muskarínový receptor
Expresia proteínov
P53 negatívny
Izoenzýmy
G6PD, A
Náchylnosť na vírusy
Vesikulárna stomatitída (Indiana), poliovírus 1
Reverzná transkriptáza
Negatívne

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilný glutamín, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion číslo výrobku 820600a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 1 ng/ml bFGF
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Plod
Etnická príslušnosť
African