Gå direkt till innehållet
HEL-299-celler
Vävnad
Lungan
Synonymer
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

HEL-299-celler

Cell line · Produktnummer 300193

HEL-299 är en cellinje av humana lungfibroblaster som härrör från en vuxen person. Denna cellinje utmärker sig särskilt genom sin begränsade förmåga att föröka sig i...

€430.00exkl. moms och frakt
Tillverkas på beställning
1

01Allmän information

Beskrivning

HEL-299 är en human lungfibroblastcellinje som härrör från en vuxen individ. Denna cellinje är särskilt känd för sin begränsade förmåga att föröka sig i odling, och går vanligtvis in i senescens efter cirka tio passager. Denna egenskap gör HEL-299 till en användbar modell för att studera cellulärt åldrande och senescens, liksom dynamiken i celltillväxt och replikation under kontrollerade förhållanden.

Utöver tillämpningarna inom åldrandeforskningen fungerar HEL-299 också som en modell för att studera signalöverföringsvägar. Specifikt har man observerat att uttrycket av den muskarina M2-receptorn i dessa celler nedregleras efter stimulering med proteinkinas C. Detta svar belyser cellinjens användbarhet inom farmakologisk forskning och vid undersökning av mekanismer som ligger till grund för receptormedierad signalering och reglering. Förändringen i receptoruttryck efter kinasaktivitet kan ge insikter i cellers svar på yttre stimuli, vilket potentiellt kan bidra till utvecklingen av terapeutiska strategier som riktar in sig på liknande vägar i olika sjukdomar.

Vävnad
Lungan
Synonymer
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Karyotyp
Normal människa, man, diploid, stabil

04Identifierare

Källa
HEL-299 (Cytion katalognummer 300193)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
M2 muskarinreceptor
Proteinexpression
P53-negativ
Isoenzymer
G6PD, A
Virusmottaglighet
Vesikulär stomatit (Indiana), poliovirus 1
Omvänt transkriptas
Negativt

06Hantering och odling

Odlingsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilt glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS, 1 ng/ml bFGF
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Foster
Etnicitet
Afrikanska