الانتقال إلى المحتوى
خلايا HEL-299
الأنسجة
الرئة
المرادفات
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

المستندات

خلايا HEL-299

Cell line · رقم المنتج 300193

HEL-299 هو خط خلوي من الخلايا الليفية الرئوية البشرية المستمدة من شخص بالغ. ويُعرف هذا الخط الخلوي بشكل خاص بقدرته المحدودة على التكاثر...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
1

01معلومات عامة

الوصف

HEL-299 هو سلالة خلايا أرومة ليفية رئوية بشرية مشتقة من شخص بالغ. ويُعرف هذا الخط الخلوي على وجه الخصوص بقدرته المحدودة على التكاثر في المستنبت، وعادةً ما يدخل مرحلة الشيخوخة بعد حوالي عشر ممرات. هذه الخاصية تجعل من HEL-299 نموذجًا مفيدًا لدراسة الشيخوخة الخلوية والشيخوخة، بالإضافة إلى ديناميكيات نمو الخلايا وتكاثرها في ظل ظروف مضبوطة.

وبالإضافة إلى تطبيقاته في أبحاث الشيخوخة، يُستخدم HEL-299 أيضاً كنموذج لدراسة مسارات نقل الإشارات. وعلى وجه التحديد، لوحظ أن التعبير عن مستقبلات المسكارين M2 في هذه الخلايا يتم تنظيمه بعد التحفيز بالبروتين كيناز C. وتسلط هذه الاستجابة الضوء على فائدة خط الخلية في الأبحاث الدوائية وفي التحقيق في الآليات الكامنة وراء الإشارات والتنظيم بوساطة المستقبلات. يمكن أن يوفر التغيير في تعبير المستقبلات بعد نشاط الكيناز رؤى حول الاستجابات الخلوية للمحفزات الخارجية، مما قد يساعد في تطوير استراتيجيات علاجية تستهدف مسارات مماثلة في مختلف الأمراض.

الأنسجة
الرئة
المرادفات
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

النمط الكروموسومي
ذكر بشري عادي، ثنائي الصبغة، مستقر

04المعرّفات

المرجع
HEL-299 (كتالوج سيتيون رقم 300193)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2480

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
المستقبلات المسكارينية M2
التعبير البروتيني
P53 سالب
الإيزوزيمات
G6PD، أ
قابلية الإصابة بالفيروس
التهاب الفم الحويصلي (إنديانا)، فيروس شلل الأطفال 1
إنزيم النسخ العكسي
سلبي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
هامز إف 12، ث: 1.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 1.0 مللي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.1 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة سيتيون 820600a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و1 نانوغرام/ملل من عامل النمو الجيني الوراثي bFGF
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الجنين
الأصل العرقي
أفريقي