Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα HEL-299
Ιστός
Πνεύμονας
Συνώνυμα
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Έγγραφα

Κύτταρα HEL-299

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300193

Η HEL-299 είναι μια κυτταρική σειρά ανθρώπινων πνευμονικών ινοβλαστών που προέρχεται από ενήλικα άτομο. Η συγκεκριμένη κυτταρική σειρά διακρίνεται ιδιαίτερα για την περιορισμένη ικανότητά της να πολλαπλασιάζεται...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η HEL-299 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά πνευμονικών ινοβλαστών που προέρχεται από ενήλικο άτομο. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ιδιαίτερα γνωστή για την πεπερασμένη ικανότητά της να πολλαπλασιάζεται σε καλλιέργεια, καθώς συνήθως εισέρχεται σε γήρανση μετά από περίπου δέκα περάσματα. Αυτό το χαρακτηριστικό καθιστά τη HEL-299 ένα χρήσιμο μοντέλο για τη μελέτη της κυτταρικής γήρανσης και γήρανσης, καθώς και της δυναμικής της κυτταρικής ανάπτυξης και του πολλαπλασιασμού υπό ελεγχόμενες συνθήκες.

Εκτός από τις εφαρμογές της στην έρευνα της γήρανσης, η HEL-299 χρησιμεύει επίσης ως μοντέλο για τη μελέτη των μονοπατιών μεταγωγής σήματος. Συγκεκριμένα, έχει παρατηρηθεί ότι η έκφραση του μουσκαρινικού υποδοχέα Μ2 στα κύτταρα αυτά ρυθμίζεται προς τα κάτω μετά από διέγερση με πρωτεϊνική κινάση C. Η απόκριση αυτή αναδεικνύει τη χρησιμότητα της κυτταρικής σειράς στη φαρμακολογική έρευνα και στη διερεύνηση των μηχανισμών που διέπουν τη σηματοδότηση και τη ρύθμιση μέσω υποδοχέα. Η μεταβολή της έκφρασης του υποδοχέα μετά τη δραστηριότητα της κινάσης μπορεί να παράσχει πληροφορίες σχετικά με τις κυτταρικές αποκρίσεις σε εξωτερικά ερεθίσματα, βοηθώντας ενδεχομένως στην ανάπτυξη θεραπευτικών στρατηγικών που στοχεύουν σε παρόμοια μονοπάτια σε διάφορες ασθένειες.

Ιστός
Πνεύμονας
Συνώνυμα
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Καρυότυπος
Φυσιολογικός ανθρώπινος άνδρας, διπλοειδής, σταθερός

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HEL-299 (αριθμός καταλόγου Cytion 300193)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_2480

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Μ2 μουσκαρινικός υποδοχέας
Έκφραση πρωτεϊνών
P53 αρνητικό
Ισοένζυμα
G6PD, A
Ευαισθησία στον ιό
Βρογχώδης στοματίτιδα (Indiana), ιός της πολιομυελίτιδας 1
Αντίστροφη μεταγραφάση
Αρνητικό

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Ham's F12, w: 1,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,1 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820600a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 1 ng/mL bFGF
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Έμβρυο
Εθνικότητα
Αφρικανική