Pereiti prie turinio
HEL-299 ląstelės
Audinys
Plaučiai
Sinonimai
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Dokumentai

HEL-299 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300193

HEL-299 – tai žmogaus plaučių fibroblastų ląstelių linija, gauta iš suaugusio asmens. Ši ląstelių linija ypač išsiskiria ribotu dauginimosi pajėgumu...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HEL-299 yra žmogaus plaučių fibroblastų ląstelių linija, gauta iš suaugusio žmogaus. Ši ląstelių linija ypač išsiskiria ribotu gebėjimu daugintis kultūroje, paprastai ji sensta maždaug po dešimties ciklų. Dėl šios savybės HEL-299 yra naudingas ląstelių senėjimo ir senėjimo, taip pat ląstelių augimo ir dauginimosi dinamikos kontroliuojamomis sąlygomis tyrimo modelis.

Be to, kad HEL-299 gali būti naudojama senėjimo tyrimams, ji taip pat yra signalų perdavimo kelių tyrimo modelis. Konkrečiai, pastebėta, kad M2 muskarino receptoriaus raiška šiose ląstelėse sumažėja po stimuliacijos baltymų kinaze C. Ši reakcija pabrėžia ląstelių linijos naudingumą farmakologiniuose tyrimuose ir tiriant mechanizmus, kuriais grindžiamas receptorių perduodamas signalas ir reguliavimas. Receptoriaus raiškos pokytis po kinazės veiklos gali padėti suprasti ląstelių atsaką į išorinius dirgiklius, o tai gali padėti kurti terapines strategijas, nukreiptas į panašius kelius sergant įvairiomis ligomis.

Audinys
Plaučiai
Sinonimai
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Kariotipas
Normalus diploidinis, stabilus, diploidinis žmogus

04Identifikatoriai

Nuoroda
HEL-299 (Cytion katalogo numeris 300193)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
M2 muskarino receptorius
Baltojų baltymų ekspresija
P53 neigiamas
Izofermentai
G6PD, A
Jautrumas virusams
Vezikulinis stomatitas (Indiana), poliovirusas 1
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilus glutaminas, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820600a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 1 ng/ml bFGF
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Vaisius
Etninė priklausomybė
Afrikos