HEL-299-solut
Cell line · Tuotenumero 300193
HEL-299 on aikuiselta potilaalta peräisin oleva ihmisen keuhkofibroblastien solulinja. Tämä solulinja tunnetaan erityisesti siitä, että sen lisääntymiskyky on rajallinen...
Räätälöinti / Suositukset
- HEL-299-solutCell line€430.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HEL-299 on ihmisen keuhkojen fibroblastisolulinja, joka on peräisin aikuiselta ihmiseltä. Tämä solulinja on tunnettu erityisesti rajallisesta lisääntymiskyvystään viljelyssä, ja se alkaa tyypillisesti vanheta noin kymmenen läpikäynnin jälkeen. Tämä ominaisuus tekee HEL-299:stä hyödyllisen mallin solujen ikääntymisen ja senesenssin sekä solujen kasvun ja lisääntymisen dynamiikan tutkimiseen kontrolloiduissa olosuhteissa.
Sen lisäksi, että HEL-299:ää käytetään ikääntymisen tutkimuksessa, se toimii myös mallina signaalinsiirtoratojen tutkimisessa. Erityisesti on havaittu, että M2-muskariinireseptorin ilmentyminen näissä soluissa vähenee proteiinikinaasi C:llä stimuloinnin jälkeen. Tämä vaste korostaa solulinjan hyödyllisyyttä farmakologisessa tutkimuksessa ja reseptorivälitteisen signaloinnin ja säätelyn taustalla olevien mekanismien tutkimisessa. Reseptorin ilmentymisen muuttuminen kinaasiaktiivisuuden seurauksena voi antaa tietoa solujen vasteista ulkoisiin ärsykkeisiin, mikä voi auttaa sellaisten terapeuttisten strategioiden kehittämisessä, jotka kohdistuvat samankaltaisiin reitteihin eri sairauksissa.
- Kudos
- Keuhkot
- Synonyymit
- HEL 299
- Hel-299
- Hel 299
- HEL299
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Karyotyyppi
- Normaali ihmisuros, diploidi, vakaa
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HEL-299 (Cytionin luettelonumero 300193)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2480
05Ilmentyminen ja alttius
- Ilmentyvät reseptorit
- M2-muskariinireseptori
- Proteiinin ilmentyminen
- P53 negatiivinen
- Isoentsyymit
- G6PD, A
- Viruksille altistuminen
- Vesikulaarinen stomatiitti (Indiana), poliovirus 1
- Käänteiskopioijaentsyymi
- Negatiivinen
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820600a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Lisätään väliaineeseen 10 % FBS, 1 ng/ml bFGF
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1 x 104 solua/cm2
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- Sikiö
- Etnisyys
- Afrikkalainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
.jpg)