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Cellules HepG2
Tissu
Foie
Maladie
Carcinome hépatocellulaire
Synonymes
HEP-G2, Hep G2, HEP G2, Hep-G2, HEPG2

Documents

Cellules HepG2

Cell line · Référence du produit 300198

Les cellules HepG2, une lignée cellulaire d'hépatoblastome, constituent un pilier des sciences biologiques, en particulier dans la recherche sur le cancer du foie. La lignée cellulaire HepG2 a été isolée pour la première fois…

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1

01Informations générales

Description

Les cellules HepG2, une lignée cellulaire d'hépatoblastome, sont une pierre angulaire de la science biologique, en particulier de la recherche sur le cancer du foie. La lignée cellulaire HepG2 a été isolée pour la première fois en 1975 et classée à tort comme carcinome hépatocellulaire. L'origine de la lignée cellulaire HepG2 comme hépatoblastome a été reconnue plus tard, clarifiant ainsi des années d'ambiguïté scientifique.

Les lignées cellulaires hépatiques humaines telles que HepG2 sont couramment utilisées comme modèles in vitro pour les hépatocytes humains primaires. Ces lignées cellulaires offrent des avantages tels qu'une prolifération indéfinie, un phénotype stable, un accès facile et une manipulation aisée. Cependant, elles présentent une expression réduite de certaines fonctions métaboliques par rapport aux hépatocytes primaires. Dérivées d'un carcinome hépatocellulaire, les cellules HepG2 prolifèrent rapidement et ont une morphologie de type épithélial, assurant de nombreuses fonctions hépatiques spécialisées. Malgré ces différences, les cellules HepG2 sont largement utilisées dans l'étude du métabolisme et de la toxicité des médicaments, grâce à leur ressemblance avec les cellules de carcinome hépatocellulaire et d'hépatoblastome en termes de métabolisme des médicaments et de protéines de transport.

HepG2 est une lignée cellulaire de cancer du foie humain souvent utilisée dans la recherche, y compris dans les études sur le métabolisme et la toxicité des médicaments. Cependant, l'une des limites des cellules d'hépatome HepG2 est l'altération de l'expression de certaines fonctions spécifiques du foie, notamment l'expression des enzymes du cytochrome P450. Les enzymes du cytochrome P450 sont essentielles pour le métabolisme des xénobiotiques (composés étrangers tels que les médicaments et les substances cancérigènes) dans le foie. L'expression altérée ou réduite de ces enzymes dans les cellules HepG2 peut affecter leur capacité à modéliser avec précision le métabolisme et l'élimination des xénobiotiques, ce qui est un aspect critique de la fonction hépatique.

La lignée cellulaire HepG2, ainsi que d'autres lignées cellulaires d'hépatome telles que les lignées cellulaires Hep3B et d'hépatome humain HepaRG, contribuent à une meilleure compréhension des cellules de carcinome hépatique humain. La lignée cellulaire se distingue par sa polyvalence, constituant un choix optimal pour la génération de lignées cellulaires stables, les études de transfection, le métabolisme des médicaments et les études d'hépatotoxicité. En outre, la lignée cellulaire HepG2 est essentielle dans une série d'applications, de la culture cellulaire en 3D au criblage à haut débit et à la toxicologie.

Tissu
Foie
Maladie
Carcinome hépatocellulaire
Applications
Cette lignée cellulaire est un choix optimal pour la transfection. En outre, les cellules HepG2 offrent un large éventail d'applications, allant de la culture cellulaire en 3D et de la recherche sur le cancer au criblage à haut débit et à la toxicologie.
Synonymes
  • HEP-G2
  • Hep G2
  • HEP G2
  • Hep-G2
  • HEPG2

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Non
Caryotype
Nombre modal = 55 (intervalle = 50 à 60), présente un réarrangement du chromosome 1
Temps de doublement
48 heures

04Identifiants

Référence
HepG2 (numéro de catalogue Cytion 300198)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0027

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Insuline, facteur de croissance analogue à l'insuline II (IGF II)
Expression des protéines
P53 positif
Produits
Albumine, alpha-fœtoprotéine (alpha-fœtoprotéine), alpha1 glycoprotéine acide (alpha-1 glycoprotéine acide), alpha1 antitrypsine (alpha-1-antitrypsine), alpha1 antichymotrypsine, (alpha-1-antichymotrypsine), alpha2 HS glycoprotéine (alpha-2-HS- glycoprotéine), alpha2 macroglobuline (alpha-2-macroglobuline), bêta lipoprotéine (bêta-lipoprotéine), céruloplasmine, activateur C4 et C3, fibrinogène, haptoglobine, plasminogène, protéine liant le rétinol (protéine liant le rétinol), transferrine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
Ham's F12, w : 1.0 mM Glutamine stable, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.1 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820600a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 à 3 x 104 cellules/cm2 pendant la culture de routine
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Commencer la culture en utilisant le contenu complet du cryovial dans des flacons de culture cellulaire 2xT25. Les cellules se rétablissent dans les 48 à 72 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
15 ans
Origine ethnique
Caucasien