Skip to content
เซลล์ HepG2
Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ
Synonyms
HEP-G2, Hep G2, HEP G2, Hep-G2, HEPG2

Documents

เซลล์ HepG2

Cell line · Product number 300198

HepG2 cells, a hepatoblastoma cell line, are a cornerstone in biological science, particularly in liver cancer research. The HepG2 cell line was first iso...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ HepG2 ซึ่งเป็นสายพันธุ์เซลล์ของมะเร็งตับอ่อน เป็นรากฐานสำคัญในวิทยาศาสตร์ชีวภาพ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการวิจัยมะเร็งตับ สายพันธุ์เซลล์ HepG2 ถูกแยกออกมาครั้งแรกในปี 1975 และถูกจัดประเภทผิดว่าเป็นมะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ (hepatocellular carcinoma) ในระยะแรก ก่อนที่แหล่งกำเนิดของสายพันธุ์เซลล์ HepG2 จะถูกยอมรับว่าเป็นมะเร็งตับอ่อน (hepatoblastoma) ในเวลาต่อมา ซึ่งได้ทำให้ความไม่ชัดเจนทางวิทยาศาสตร์ที่มีมาหลายปีได้รับการชี้แจง

เซลล์ไลน์ตับมนุษย์ เช่น HepG2 มักถูกใช้เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองสำหรับเซลล์ตับมนุษย์ปฐมภูมิ เซลล์ไลน์เหล่านี้มีข้อดี เช่น การเพิ่มจำนวนอย่างไม่จำกัด ลักษณะทางฟีโนไทป์ที่คงที่ การเข้าถึงได้ง่าย และการจัดการที่สะดวก อย่างไรก็ตาม เซลล์เหล่านี้แสดงการแสดงออกของหน้าที่เมตาบอลิซึมบางประการที่ลดลงเมื่อเทียบกับเซลล์ตับปฐมภูมิ HepG2 มีต้นกำเนิดจากมะเร็งตับชนิด hepatocellular carcinoma มีการเพิ่มจำนวนอย่างรวดเร็วและมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว โดยสามารถทำหน้าที่เฉพาะทางของตับได้หลายประการแม้จะมีความแตกต่างเหล่านี้ เซลล์ HepG2 ก็ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาการเผาผลาญยาและพิษของยา เนื่องจากมีความคล้ายคลึงกับเซลล์มะเร็งตับชนิด hepatocellular carcinoma และ hepatoblastoma ในแง่ของการเผาผลาญยาและโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการขนส่งยา

HepG2 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งตับของมนุษย์ที่มักใช้ในการวิจัย รวมถึงการศึกษาเกี่ยวกับการเผาผลาญยาและพิษวิทยาของยา อย่างไรก็ตาม หนึ่งในข้อจำกัดของเซลล์มะเร็งตับ HepG2 คือการแสดงออกที่เปลี่ยนแปลงไปของหน้าที่เฉพาะของตับบางประการ รวมถึงการแสดงออกของเอนไซม์ไซโตโครม P450เอนไซม์ไซโตโครม P450 มีความจำเป็นต่อการเผาผลาญสารแปลกปลอม (สารประกอบต่างถิ่น เช่น ยาและสารก่อมะเร็ง) ในตับ การเปลี่ยนแปลงหรือการลดลงของการแสดงออกของเอนไซม์เหล่านี้ในเซลล์ HepG2 สามารถส่งผลต่อความสามารถในการจำลองการเผาผลาญและการกำจัดสารแปลกปลอมได้อย่างแม่นยำ ซึ่งเป็นแง่มุมที่สำคัญของการทำงานของตับ

สายเซลล์ HepG2 ร่วมกับสายเซลล์มะเร็งตับชนิดอื่น ๆ เช่น Hep3B และสายเซลล์มะเร็งตับของมนุษย์ HepaRG มีบทบาทสำคัญในการเพิ่มความเข้าใจเกี่ยวกับเซลล์มะเร็งตับของมนุษย์ สายเซลล์นี้โดดเด่นด้วยความหลากหลายในการใช้งาน เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการสร้างสายเซลล์ที่คงตัว การศึกษาการถ่ายโอนยีน การศึกษาการเผาผลาญยา และการศึกษาความเป็นพิษต่อตับนอกจากนี้ สายเซลล์ HepG2 ยังมีความสำคัญอย่างยิ่งในหลากหลายการประยุกต์ใช้ ตั้งแต่การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติไปจนถึงการคัดกรองสารด้วยวิธีอัตโนมัติสูงและพิษวิทยา

Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ
Applications
สายเซลล์นี้เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการถ่ายโอนยีน นอกจากนี้ เซลล์ HepG2 ยังมีการประยุกต์ใช้ที่หลากหลาย ตั้งแต่การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติและการวิจัยมะเร็ง ไปจนถึงการคัดกรองแบบความจุสูงและพิษวิทยา
Synonyms
  • HEP-G2
  • Hep G2
  • HEP G2
  • Hep-G2
  • HEPG2

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ไม่
Karyotype
ค่ามัธยฐาน = 55 (ช่วง = 50 ถึง 60) มีโครโมโซมที่จัดเรียงใหม่ในโครโมโซมที่ 1
Doubling time
48 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HepG2 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300198)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0027

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
อินซูลิน, อินซูลิน-ไลค์ โกรท แฟคเตอร์ II (IGF II)
Protein expression
P53 เป็นบวก
Products
อัลบูมิน, อัลฟา-เฟโตโปรตีน (อัลฟา-เฟโตโปรตีน), อัลฟา1 แอซิดไกลโคโปรตีน (อัลฟา-1 แอซิดไกลโคโปรตีน), อัลฟา1 แอนติทริปซิน (อัลฟา-1-แอนติทริปซิน), อัลฟา1 แอนติไคมอทริปซิน, (อัลฟา-1-แอนติไคมอทริปซิน),อัลฟา2 เอชเอส ไกลโคโปรตีน (alpha-2-HS-glycoprotein), อัลฟา2 แมคโครโกลบูลิน (alpha-2-macroglobulin), เบตา ไลโปโปรตีน (beta-lipoprotein), เซรูโลพลาสมิน, ตัวกระตุ้น C4 และ C3, ไฟบรินเจน, แฮปโตโกลบิน, พลาสมิโนเจน, รีตินอล บินดิ้ง โปรตีน (retinol binding protein), ทรานส์เฟอริน

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 1.0 mM โซเดียมไพรูเวต, w: 1.1 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 ถึง 3 x 104 เซลล์/cm2 ระหว่างการเพาะเลี้ยงตามปกติ
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
เริ่มเพาะเลี้ยงโดยใช้สารทั้งหมดจากหลอดแช่แข็งในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาด 2xT25 เซลล์จะฟื้นตัวภายใน 48 ถึง 72 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
15 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน