خلايا HepG2

تُعد خلايا HepG2، وهي خط خلايا الورم الأرومي الكبدي، حجر الزاوية في العلوم البيولوجية، وخاصة في أبحاث سرطان الكبد. تم عزل سلالة خلايا HepG2 لأول مرة في عام 1975 وتم تصنيفها في البداية على أنها سرطان الخلايا الكبدية، ثم تم التعرف على أصل سلالة خلايا HepG2 على أنها ورم أرومي كبدي لاحقاً، مما أوضح سنوات من الغموض العلمي.

يشيع استخدام خطوط الخلايا الكبدية البشرية مثل HepG2 كنماذج مختبرية للخلايا الكبدية البشرية الأولية. تقدم هذه الخطوط الخلوية مزايا مثل الانتشار غير المحدود والنمط الظاهري المستقر وسهولة الوصول إليها وسهولة التلاعب بها. ومع ذلك، فإنها تُظهر تعبيرًا منخفضًا عن بعض الوظائف الأيضية مقارنةً بالخلايا الكبدية الأولية. تتكاثر خلايا HepG2 المشتقة من سرطان الخلايا الكبدية، وتتكاثر بسرعة وتتميز بمورفولوجيا تشبه الخلايا الظهارية، وتؤدي العديد من الوظائف الكبدية المتخصصة. على الرغم من هذه الاختلافات، تُستخدم خلايا HepG2 على نطاق واسع في دراسة استقلاب الأدوية وسميتها، وذلك بفضل تشابهها مع خلايا سرطان الخلايا الكبدية والورم الأرومي الكبدي من حيث استقلاب الأدوية وبروتينات النقل.

HepG2 هو خط خلايا سرطان الكبد البشري الذي غالبًا ما يُستخدم في الأبحاث، بما في ذلك الدراسات حول استقلاب الدواء والسمية. ومع ذلك، فإن أحد أوجه القصور في خلايا HepG2 الكبدية هو تغير تعبيرها عن بعض الوظائف الخاصة بالكبد، بما في ذلك التعبير عن إنزيمات السيتوكروم P450. تُعد إنزيمات السيتوكروم P450 ضرورية لاستقلاب المواد الغريبة الحيوية (مركبات غريبة مثل الأدوية والمواد المسرطنة) في الكبد. يمكن للتعبير المتغير أو المنخفض لهذه الإنزيمات في خلايا HepG2 أن يؤثر على قدرتها على نمذجة عملية التمثيل الغذائي والتخلص من المواد الزينوبيوتيك بدقة وهو جانب مهم من جوانب وظائف الكبد.

ويساهم خط خلايا HepG2 إلى جانب خطوط خلايا الورم الكبدي الأخرى مثل خط خلايا Hep3B وخطوط خلايا HepaRG الكبدية البشرية في فهم أوسع لخلايا سرطان الكبد البشري. ويتميز هذا الخط الخلوي بتعدد استخداماته، حيث يعد الخيار الأمثل لتوليد خط خلوي مستقر، ودراسات نقل العدوى، واستقلاب الأدوية، ودراسات السمية الكبدية. وعلاوة على ذلك، يعتبر خط خلايا HepG2 محورياً في مجموعة من التطبيقات، بدءاً من زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد إلى الفحص عالي الإنتاجية وعلم السموم.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان