الانتقال إلى المحتوى
خلايا HuH7
الأنسجة
الكبد
المرض
سرطان الخلايا الكبدية
موقع الانتشار
الورم الكبدي
المرادفات
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

المستندات

خلايا HuH7

Cell line · رقم المنتج 300156

خلايا HuH-7 هي سلالة خلوية شبيهة بالخلايا الظهارية وقادرة على تكوين الأورام، تم استخلاصها في البداية من ورم في الكبد لدى رجل ياباني يبلغ من العمر 57 عامًا في عام 1982. الكبد البشري...

€650.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خلايا HuH-7 هي نوع من خطوط الخلايا الظهارية الشبيهة بالورم السرطاني المأخوذة في البداية من ورم كبدي لدى ذكر ياباني يبلغ من العمر 57 عاماً في عام 1982. وقد استُخدم خط خلايا HuH-7 المشتق من الورم الكبدي البشري ومشتقاته على نطاق واسع في الأبحاث كبديل تجريبي مناسب للخلايا الكبدية الأولية. وعلى وجه الخصوص، كان لها دور فعال في أبحاث التهاب الكبد C واستخدمت كخلايا مضيفة لتكاثر الفيروس في المختبر. وقد لعبت خلايا HuH-7 دورًا حاسمًا في أبحاث التهاب الكبد C، خاصةً عندما يتعلق الأمر بتطوير الأدوية. فقبل عام 2005، لم يتمكن الباحثون قبل عام 2005 من زراعة فيروس التهاب الكبد C في المختبر، مما جعل من الصعب اختبار الأدوية المحتملة المرشحة ضده.

لكن إدخال خط خلايا HuH-7 غيّر ذلك. هذه الخلايا متسامحة للغاية مع تكاثر فيروس التهاب الكبد C، مما يجعلها مثالية للاختبار في المختبر. وباستخدام خلايا HuH-7، تمكّن الباحثون من فحص الأدوية المرشحة ضد فيروس التهاب الكبد C المزروع في المختبر، مما مهد الطريق لتطوير عقاقير جديدة لمكافحة الفيروس. على عكس خطوط خلايا الورم الكبدي البشري الأخرى الراسخة، يمكن إكثار خلايا HuH-7 في وسط محدد كيميائياً يحتوي على كميات ضئيلة من السيلينيوم بدلاً من المصل. وهذا يسمح بإجراء دراسات منهجية للتأثيرات المختبرية للمركبات المختلفة على نموها واستقلابها.

الأنسجة
الكبد
المرض
سرطان الخلايا الكبدية
موقع الانتشار
الورم الكبدي
المرادفات
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية.
زمن المضاعفة
48 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HuH7 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300156)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0336

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
سالب لفيروس الورم الحليمي البشري وفيروس التهاب الكبد الوبائي سي وفيروس نقص المناعة البشري.

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 2 × 104 خلية/سم2 أثناء زراعة الخلايا الروتينية
تجديد السوائل
كل 3 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
ابدأ الزراعة باستخدام 2 إلى 3 × 104 خلية/سم2. ستتعافى الخلايا في غضون 24 إلى 48 ساعة.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
57 سنة
الأصل العرقي
ياباني