İçeriğe atla
HuH7 Hücreleri
Doku
Karaciğer
Hastalık
Hepatoselüler karsinom
Metastaz yeri
Hepatoma
Eş anlamlılar
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

HuH7 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300156

HuH-7 hücreleri, 1982 yılında 57 yaşındaki bir Japon erkekteki karaciğer tümöründen ilk kez elde edilen, epitel benzeri, tümör oluşturucu bir hücre hattıdır. İnsan karaciğer...

€650.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HuH-7 hücreleri, ilk olarak 1982 yılında 57 yaşındaki bir Japon erkeğin karaciğer tümöründen alınan epitel benzeri, tümörijenik bir hücre hattı türüdür. İnsan hepatoma türevi HuH-7 hücre hattı ve türevleri, birincil hepatositler için uygun bir deneysel ikame olarak araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Özellikle, hepatit C araştırmalarında etkili olmuşlar ve virüsü in vitro yaymak için konak hücre olarak kullanılmışlardır. HuH-7 hücreleri, özellikle ilaç geliştirme söz konusu olduğunda, hepatit C araştırmalarında çok önemli bir rol oynamıştır. 2005 yılından önce araştırmacılar hepatit C virüsünü laboratuvarda yetiştiremedikleri için potansiyel ilaç adaylarını bu virüse karşı test etmek zordu.

HuH-7 hücre hattının kullanıma girmesi bunu değiştirdi. Bu hücreler hepatit C virüsünün replikasyonuna son derece müsamahakârdır ve bu da onları in vitro testler için ideal hale getirmektedir. Araştırmacılar HuH-7 hücrelerini kullanarak, laboratuvarda yetiştirilen hepatit C'ye karşı ilaç adaylarını tarayabildiler ve bu da virüsle savaşmak için yeni ilaçların geliştirilmesinin yolunu açtı. Diğer yerleşik insan hepatoma hücre hatlarının aksine, HuH-7 hücreleri serum yerine eser miktarda selenyum içeren kimyasal olarak tanımlanmış bir ortamda çoğaltılabilir. Bu, çeşitli bileşiklerin büyüme ve metabolizmaları üzerindeki in vitro etkilerinin sistematik olarak incelenmesine olanak sağlamaktadır.

Doku
Karaciğer
Hastalık
Hepatoselüler karsinom
Metastaz yeri
Hepatoma
Eş anlamlılar
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde.
İki katına çıkma süresi
48 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HuH7 (Cytion katalog numarası 300156)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05İfade ve duyarlılık

Virüsler
HPV, HCV ve HIV negatif.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
Rutin hücre kültürü sırasında 1 ila 2 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
Her 3 günde bir
Çözülme sonrası toparlanma
2 ila 3 x 104 hücre/cm2 kullanarak kültürü başlatın. Hücreler 24 ila 48 saat içinde iyileşecektir.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
57 yıl
Etnik köken
Japonca