Gå direkt till innehållet
HuH7-celler
Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Metastaseringsställe
Hepatom
Synonymer
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

HuH7-celler

Cell line · Produktnummer 300156

HuH-7-celler är en typ av epitelliknande, tumörbildande cellinje som ursprungligen isolerades från en levertumör hos en 57-årig japansk man år 1982. Den humana lever...

€650.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HuH-7-celler är en typ av epitelliknande, tumörframkallande cellinje som ursprungligen togs från en levertumör hos en 57-årig japansk man 1982. Den humana hepatomderiverade HuH-7-cellinjen och dess derivat har använts i stor utsträckning inom forskningen som ett bekvämt experimentellt substitut för primära hepatocyter. De har framför allt varit viktiga inom hepatit C-forskningen och använts som värdceller för att sprida viruset in vitro. HuH-7-celler har spelat en avgörande roll inom hepatit C-forskningen, särskilt när det gäller läkemedelsutveckling. Före 2005 kunde forskarna inte odla hepatit C-viruset i laboratoriet, vilket gjorde det svårt att testa potentiella läkemedelskandidater mot det.

Introduktionen av HuH-7-cellinjen förändrade detta. Dessa celler är mycket toleranta mot replikering av hepatit C-viruset, vilket gör dem idealiska för in vitro-testning. Genom att använda HuH-7-cellerna kunde forskarna screena läkemedelskandidater mot laboratorieodlad hepatit C, vilket banade väg för utvecklingen av nya läkemedel mot viruset. Till skillnad från andra etablerade humana hepatomcellinjer kan HuH-7-cellerna förökas i ett kemiskt definierat medium som innehåller spårmängder av selen i stället för serum. Detta möjliggör systematiska studier av in vitro-effekter av olika föreningar på deras tillväxt och metabolism.

Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Metastaseringsställe
Hepatom
Synonymer
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss.
Fördubblingstid
48 timmar

04Identifierare

Källa
HuH7 (Cytion katalognummer 300156)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Uttryck och mottaglighet

Virus
Negativt för HPV, HCV och HIV.

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 till 2 x 104 celler/cm2 under rutinmässig cellodling
Vätskeförnyelse
Var 3:e dag
Återhämtning efter upptining
Starta odlingen med 2 till 3 x 104 celler/cm2. Cellerna återhämtar sig inom 24 till 48 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
57 år
Etnicitet
Japanska