_(1).jpg)
- Audinys
- Kepenys
- Liga
- Hepatocelulinė karcinoma
- Metastazių vieta
- Hepatoma
- Sinonimai
- HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39
Dokumentai
HuH7 ląstelės
Cell line · Prekės numeris 300156
HuH-7 ląstelės – tai epitelio tipo, naviką sukeliančios ląstelių linija, kuri 1982 m. buvo paimta iš 57 metų amžiaus japonų vyro kepenų naviko. Žmogaus kepenų...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HuH7 ląstelėsCell line€650.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
HuH-7 ląstelės - tai epitelio tipo navikinių ląstelių linija, iš pradžių paimta 1982 m. iš 57 metų japono kepenų naviko. Žmogaus hepatomos HuH-7 ląstelių linija ir jos dariniai plačiai naudojami moksliniuose tyrimuose kaip patogus eksperimentinis pirminių hepatocitų pakaitalas. Ypač jos padėjo atlikti hepatito C tyrimus ir buvo naudojamos kaip ląstelės šeimininkės virusui dauginti in vitro. HuH-7 ląstelės atliko labai svarbų vaidmenį hepatito C tyrimuose, ypač kuriant vaistus. Iki 2005 m. mokslininkai negalėjo laboratorijoje auginti hepatito C viruso, todėl buvo sunku išbandyti galimus vaistus nuo jo.
HuH-7 ląstelių linija pakeitė šią situaciją. Šios ląstelės yra labai tolerantiškos hepatito C viruso replikacijai, todėl idealiai tinka in vitro bandymams. Naudodami HuH-7 ląsteles, mokslininkai galėjo patikrinti kandidatus į vaistus nuo laboratorijoje užauginto hepatito C, o tai atvėrė kelią naujų vaistų nuo šio viruso kūrimui. Skirtingai nuo kitų sukurtų žmogaus hepatomos ląstelių linijų, HuH-7 ląsteles galima dauginti chemiškai apibrėžtoje terpėje, kurioje vietoj serumo yra pėdsakinis seleno kiekis. Tai leidžia sistemingai tirti įvairių junginių poveikį jų augimui ir metabolizmui in vitro.
- Audinys
- Kepenys
- Liga
- Hepatocelulinė karcinoma
- Metastazių vieta
- Hepatoma
- Sinonimai
- HuH-7
- HUH-7
- Huh-7
- Huh7
- HUH7
- HUH7.0
- JTC-39
- Japanese Tissue Culture-39
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Tumorogeninis
- Taip, nuogoms pelėms.
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- 48 valandos
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HuH7 (Cytion katalogo numeris 300156)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0336
05Išraiška ir jautrumas
- Virusai
- ŽPV, HCV ir ŽIV testai neigiami.
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1–2 x 104 ląstelės/cm2 įprastinės ląstelių kultūros metu
- Skysčių atnaujinimas
- Kas 3 dienas
- Atkūrimas po atšilimo
- Pradėkite kultūrą naudodami 2–3 x 104 ląsteles/cm2. Ląstelės atsigaus per 24–48 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 57 metai
- Etninė priklausomybė
- Japonų
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip