Pereiti prie turinio
HuH7 ląstelės
Audinys
Kepenys
Liga
Hepatocelulinė karcinoma
Metastazių vieta
Hepatoma
Sinonimai
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Dokumentai

HuH7 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300156

HuH-7 ląstelės – tai epitelio tipo, naviką sukeliančios ląstelių linija, kuri 1982 m. buvo paimta iš 57 metų amžiaus japonų vyro kepenų naviko. Žmogaus kepenų...

€650.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HuH-7 ląstelės - tai epitelio tipo navikinių ląstelių linija, iš pradžių paimta 1982 m. iš 57 metų japono kepenų naviko. Žmogaus hepatomos HuH-7 ląstelių linija ir jos dariniai plačiai naudojami moksliniuose tyrimuose kaip patogus eksperimentinis pirminių hepatocitų pakaitalas. Ypač jos padėjo atlikti hepatito C tyrimus ir buvo naudojamos kaip ląstelės šeimininkės virusui dauginti in vitro. HuH-7 ląstelės atliko labai svarbų vaidmenį hepatito C tyrimuose, ypač kuriant vaistus. Iki 2005 m. mokslininkai negalėjo laboratorijoje auginti hepatito C viruso, todėl buvo sunku išbandyti galimus vaistus nuo jo.

HuH-7 ląstelių linija pakeitė šią situaciją. Šios ląstelės yra labai tolerantiškos hepatito C viruso replikacijai, todėl idealiai tinka in vitro bandymams. Naudodami HuH-7 ląsteles, mokslininkai galėjo patikrinti kandidatus į vaistus nuo laboratorijoje užauginto hepatito C, o tai atvėrė kelią naujų vaistų nuo šio viruso kūrimui. Skirtingai nuo kitų sukurtų žmogaus hepatomos ląstelių linijų, HuH-7 ląsteles galima dauginti chemiškai apibrėžtoje terpėje, kurioje vietoj serumo yra pėdsakinis seleno kiekis. Tai leidžia sistemingai tirti įvairių junginių poveikį jų augimui ir metabolizmui in vitro.

Audinys
Kepenys
Liga
Hepatocelulinė karcinoma
Metastazių vieta
Hepatoma
Sinonimai
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms.
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
48 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
HuH7 (Cytion katalogo numeris 300156)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
ŽPV, HCV ir ŽIV testai neigiami.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–2 x 104 ląstelės/cm2 įprastinės ląstelių kultūros metu
Skysčių atnaujinimas
Kas 3 dienas
Atkūrimas po atšilimo
Pradėkite kultūrą naudodami 2–3 x 104 ląsteles/cm2. Ląstelės atsigaus per 24–48 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
57 metai
Etninė priklausomybė
Japonų