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HuH7 細胞
Tissue
肝臟
Disease
肝細胞癌
Metastatic site
肝細胞癌
Synonyms
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

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HuH7 細胞

Cell line · Product number 300156

HuH-7 cells are a type of epithelial-like, tumorigenic cell line initially taken from a liver tumor in a 57-year-old Japanese male in 1982. The human hepa...

US$550.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

HuH-7 細胞是一種上皮樣、具致瘤性的細胞系,最初於 1982 年從一名 57 歲日本男性患者的肝腫瘤中分離出來。 源自人類肝癌的 HuH-7 細胞系及其衍生物,作為原代肝細胞的便捷實驗替代品,已廣泛應用於研究中。特別是,它們在 C 型肝炎研究中發揮了關鍵作用,並被用作體外培養該病毒的宿主細胞。 HuH-7 細胞在 C 型肝炎研究中扮演了關鍵角色,特別是在藥物開發方面。在 2005 年之前,研究人員無法在實驗室中培養 C 型肝炎病毒,這使得測試針對該病毒的潛在候選藥物變得十分困難。

HuH-7 細胞系的問世改變了這一現狀。這些細胞對 C 型肝炎病毒的複製具有高度容許性,使其成為體外測試的理想選擇。透過使用 HuH-7 細胞,研究人員得以針對實驗室培養的 C 型肝炎病毒篩選藥物候選物,這為開發對抗該病毒的新藥鋪平了道路。 與其他已建立的人類肝癌細胞系不同,HuH-7 細胞可在含有微量硒(取代血清)的化學定義培養基中增殖。這使得研究人員能夠系統性地研究各種化合物對其生長與代謝的體外影響。

Tissue
肝臟
Disease
肝細胞癌
Metastatic site
肝細胞癌
Synonyms
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣
Tumourigenic
是的,在裸鼠身上。
Doubling time
48 小時

04Identifiers

Citation
HuH7(Cytion 型號 300156)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Expression and susceptibility

Viruses
HPV、HCV 及 HIV 檢測結果均為陰性。

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
在常規細胞培養過程中,細胞密度為 1 至 2 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每 3 天
Post-thaw recovery
以 2 至 3 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度開始培養。細胞將在 24 至 48 小時內恢復生長。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
57年
Ethnicity
日文