Перейти до вмісту
Клітини HuH7
Тканина
Печінка
Хвороба
Гепатоцелюлярна карцинома
Місце метастазування
Гепатома
Синоніми
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Документи

Клітини HuH7

Cell line · Номер товару 300156

Клітини HuH-7 — це епітеліоподібна пухлиногенна клітинна лінія, яка була вперше виділена з пухлини печінки 57-річного японського чоловіка у 1982 році. Людська печінка...

€650.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини HuH-7 - це тип епітеліоподібних пухлинних клітин, які спочатку були отримані з пухлини печінки 57-річного японського чоловіка в 1982 році. Клітинна лінія HuH-7, отримана з гепатоми людини, та її похідні широко використовуються в дослідженнях як зручний експериментальний замінник первинних гепатоцитів. Зокрема, вони відіграли важливу роль у дослідженні гепатиту С і використовувалися як клітини-господарі для розмноження вірусу in vitro. Клітини HuH-7 відіграють вирішальну роль у дослідженні гепатиту С, особливо коли йдеться про розробку ліків. До 2005 року дослідники не могли культивувати вірус гепатиту С в лабораторних умовах, що ускладнювало тестування потенційних ліків проти нього.

Впровадження клітинної лінії HuH-7 змінило цю ситуацію. Ці клітини мають високу пермісивність до реплікації вірусу гепатиту С, що робить їх ідеальними для тестування in vitro. Використовуючи клітини HuH-7, дослідники змогли провести скринінг кандидатів у ліки проти лабораторно вирощеного гепатиту С, що відкрило шлях до розробки нових препаратів для боротьби з вірусом. На відміну від інших відомих клітинних ліній гепатоми людини, клітини HuH-7 можна розмножувати в хімічно визначеному середовищі, що містить слідові кількості селену замість сироватки. Це дозволяє систематично вивчати in vitro вплив різних сполук на їх ріст і метаболізм.

Тканина
Печінка
Хвороба
Гепатоцелюлярна карцинома
Місце метастазування
Гепатома
Синоніми
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, на голих мишах.
Час подвоєння
48 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HuH7 (номер за каталогом Cytion 300156)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0336

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
Негативний на ВПЛ, ВГС та ВІЛ.

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1–2 × 104 клітин/см² під час рутинного культивування клітин
Оновлення рідини
Кожні 3 дні
Відновлення після відлиги
Почніть культивування, використовуючи 2–3 × 104 клітин/см2. Клітини відновляться протягом 24–48 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
57 років
Етнічна приналежність
Японський