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HuH7細胞
ティッシュ
肝臓
病気
肝細胞癌
転移部位
肝腫
同義語
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

HuH7細胞

Cell line · 製品番号 300156

HuH-7細胞は、1982年に57歳の日本人男性の肝腫瘍から初めて採取された、上皮様で腫瘍形成能を持つ細胞株の一種である。ヒト肝...

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01概要

説明

HuH-7細胞は、1982年に57歳の日本人男性の肝臓腫瘍から最初に採取された上皮様腫瘍細胞株の一種である。ヒト肝腫瘍由来のHuH-7細胞株とその誘導体は、初代肝細胞の簡便な実験的代用として研究に広く用いられてきた。特に、C型肝炎の研究に役立っており、試験管内でウイルスを増殖させる宿主細胞として用いられてきた。HuH-7細胞はC型肝炎の研究、特に薬剤開発において重要な役割を果たしてきた。2005年以前は、研究者は実験室でC型肝炎ウイルスを培養することができず、C型肝炎ウイルスに対する潜在的な薬剤候補を試験することが困難であった。

HuH-7細胞株の導入がそれを変えた。この細胞はC型肝炎ウイルスの複製に対して非常に寛容であり、試験管内試験に理想的である。HuH-7細胞を用いることで、研究者たちは実験室で培養したC型肝炎ウイルスに対する薬剤候補をスクリーニングすることができ、C型肝炎ウイルスと闘う新薬開発の道が開かれたのである。他の確立されたヒト肝細胞株とは異なり、HuH-7細胞は血清の代わりに微量のセレンを含む化学的に定義された培地で増殖させることができる。このため、細胞の増殖と代謝に及ぼす様々な化合物のin vitro効果を系統的に研究することができる。

ティッシュ
肝臓
病気
肝細胞癌
転移部位
肝腫
同義語
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。
倍増時間
48時間

04識別子

引用
HuH7 (Cytion カタログ番号 300156)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0336

05発現と感受性

ウイルス
HPV、HCV、HIVは陰性。

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
通常の細胞培養において、1~2×10⁴細胞/cm²
流体の更新
3日ごと
解凍後の回復
2~3×10⁴細胞/cm²を用いて培養を開始する。細胞は24~48時間以内に回復する。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
57年
民族
日本語