Tartalomra ugrás
HuH7 sejtek
Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Áttétes hely
Hepatoma
Szinonimák
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Dokumentumok

HuH7 sejtek

Cell line · Termékszám 300156

A HuH-7 sejtek egy epitheliumszerű, tumorigenikus sejtvonal, amelyet eredetileg 1982-ben egy 57 éves japán férfi májdaganatából izoláltak. Az emberi máj...

€650.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HuH-7 sejtek egyfajta epithelszerű, tumorigén sejtvonal, amelyet eredetileg egy 57 éves japán férfi májdaganatából vettek 1982-ben. A humán hepatomából származó HuH-7 sejtvonalat és származékait széles körben használják a kutatásban, mint a primer hepatociták kényelmes kísérleti helyettesítőjét. Különösen a hepatitis C kutatásában játszottak fontos szerepet, és gazdasejtként használták őket a vírus in vitro szaporításához. A HuH-7 sejtek döntő szerepet játszottak a hepatitis C kutatásban, különösen a gyógyszerfejlesztés terén. 2005 előtt a kutatók nem tudták a hepatitis C vírust laboratóriumban tenyészteni, ami megnehezítette a potenciális gyógyszerjelöltek ellene történő tesztelését.

A HuH-7 sejtvonal bevezetése megváltoztatta ezt. Ezek a sejtek rendkívül megengedőek a hepatitis C vírus szaporodásával szemben, így ideálisak az in vitro teszteléshez. A HuH-7 sejtek használatával a kutatók képesek voltak a gyógyszerjelölteket laboratóriumban termesztett hepatitis C ellen szűrni, ami megnyitotta az utat a vírus elleni új gyógyszerek kifejlesztése előtt. Más bevett humán hepatóma sejtvonalakkal ellentétben a HuH-7 sejtek kémiailag meghatározott közegben szaporíthatók, amely a szérum helyett nyomokban szelént tartalmaz. Ez lehetővé teszi a különböző vegyületek növekedésre és anyagcserére gyakorolt in vitro hatásainak szisztematikus vizsgálatát.

Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Áttétes hely
Hepatoma
Szinonimák
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egereken.
Kettőzési idő
48 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HuH7 (Cytion katalógusszám: 300156)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
Negatív HPV-re, HCV-re és HIV-re.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–2 x 104 sejt/cm2 rutin sejtkultúra során
Folyadékcsere
3 naponta
Az olvadás utáni helyreállás
Kezdje el a tenyésztést 2–3 x 104 sejt/cm2 felhasználásával. A sejtek 24–48 órán belül helyreállnak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
57 év
Etnikai hovatartozás
Japán