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Cellules HuH7
Tissu
Foie
Maladie
Carcinome hépatocellulaire
Site métastatique
Hépatome
Synonymes
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Documents

Cellules HuH7

Cell line · Référence du produit 300156

Les cellules HuH-7 constituent une lignée cellulaire tumorigène de type épithélial, initialement prélevée en 1982 sur une tumeur hépatique chez un homme japonais âgé de 57 ans. Le foie humain...

€650.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules HuH-7 sont un type de lignée cellulaire tumorigène de type épithélial, initialement prélevée sur une tumeur du foie chez un Japonais de 57 ans en 1982. La lignée cellulaire HuH-7 dérivée d'un hépatome humain et ses dérivés ont été largement utilisés en recherche comme substitut expérimental pratique aux hépatocytes primaires. Elles ont notamment joué un rôle déterminant dans la recherche sur l'hépatite C et ont été utilisées comme cellules hôtes pour la propagation du virus in vitro. Les cellules HuH-7 ont joué un rôle crucial dans la recherche sur l'hépatite C, notamment en ce qui concerne le développement de médicaments. Avant 2005, les chercheurs n'étaient pas en mesure de cultiver le virus de l'hépatite C en laboratoire, ce qui rendait difficile le test de médicaments potentiels contre ce virus.

L'introduction de la lignée cellulaire HuH-7 a changé la donne. Ces cellules sont très permissives à la réplication du virus de l'hépatite C, ce qui les rend idéales pour les tests in vitro. En utilisant les cellules HuH-7, les chercheurs ont pu tester des médicaments candidats contre l'hépatite C cultivée en laboratoire, ce qui a ouvert la voie au développement de nouveaux médicaments pour lutter contre le virus. Contrairement à d'autres lignées cellulaires d'hépatome humain, les cellules HuH-7 peuvent être multipliées dans un milieu chimiquement défini contenant des traces de sélénium à la place du sérum. Cela permet d'étudier systématiquement les effets in vitro de divers composés sur leur croissance et leur métabolisme.

Tissu
Foie
Maladie
Carcinome hépatocellulaire
Site métastatique
Hépatome
Synonymes
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, sur des souris nues.
Temps de doublement
48 heures

04Identifiants

Référence
HuH7 (numéro de catalogue Cytion 300156)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Expression et sensibilité

Virus
Négatif pour le VPH, le VHC et le VIH.

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 à 2 x 104 cellules/cm2 pendant la culture cellulaire de routine
Renouvellement des fluides
Tous les 3 jours
Récupération après le dégel
Commencez la culture en utilisant 2 à 3 x 104 cellules/cm2. Les cellules se rétabliront dans les 24 à 48 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
57 ans
Origine ethnique
Japonais