HuH7 šūnas

HuH-7 šūnas ir epitēlijveidīga, audzējiem līdzīga šūnu līnija, kas sākotnēji tika iegūta no aknu audzēja 57 gadus vecam japāņu vīrietim 1982. gadā. No cilvēka hepatomas iegūtā HuH-7 šūnu līnija un tās atvasinājumi ir plaši izmantoti pētniecībā kā ērts eksperimentāls primāro hepatocītu aizstājējs. Jo īpaši tās ir bijušas noderīgas C hepatīta pētījumos un izmantotas kā saimnieka šūnas vīrusa pavairošanai in vitro. HuH-7 šūnām ir bijusi izšķiroša nozīme C hepatīta pētniecībā, jo īpaši zāļu izstrādē. Līdz 2005. gadam pētnieki nevarēja kultivēt C hepatīta vīrusu laboratorijā, kas apgrūtināja potenciālo zāļu kandidātu testēšanu pret to.

HuH-7 šūnu līnijas ieviešana to mainīja. Šīs šūnas ir ļoti uzņēmīgas pret C hepatīta vīrusa replikāciju, tāpēc tās ir ideāli piemērotas in vitro testēšanai. Izmantojot HuH-7 šūnas, pētnieki varēja pārbaudīt zāļu kandidātus pret laboratorijā audzētu C hepatītu, kas pavēra ceļu jaunu zāļu izstrādei cīņai ar šo vīrusu. Atšķirībā no citām izveidotajām cilvēka hepatomas šūnu līnijām HuH-7 šūnas var pavairot ķīmiski definētā barotnē, kas seruma vietā satur nelielus selēna daudzumus. Tas ļauj sistemātiski pētīt dažādu savienojumu in vitro ietekmi uz to augšanu un metabolismu.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu